脐带血CIK细胞的详细制备及培养过程 刚开始做希望大家多多帮忙

pengxuleo

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+ g! K, O' i. Y+ e1 PCD56和CD16是NK的表面标记物，一般细胞分型检测时都会检测的。

leaderhou

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; X$ g3 Z! f. N/ I0 }; O/ e7 Q& |/ A2 \, P
6*107是一次的接种细胞量吗？6*107/ml的初始接种密度是不是太高了啊，文献上大都在1-2*106的接种密度啊

leaderhou

回复 小刘 的帖子4 A% a6 `, Y% {- z! }& d9 w. I+ z

" f8 J, l8 R( R$ K0 o, R4 l2 a' M比如100ml脐血，分离得到了1.2*108的细胞，那么我的接种细胞数就控制在6-8*107就可以了吗，我们用175cm2的瓶子接种，接种密度呢？

leaderhou

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1 w! z$ z* A% B
7 `8 _& W) p& Z我们养的CIK细胞的增殖倍数都很好，我甚至养过一次14天的增殖倍数到了1000多倍，但是CD3CD56的双阳率一直不高，不知是什么原因呢。我们自己做流式，也曾经送去第三方检验，流式应该没有太大问题，还是培养体系的问题。

海北

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3 |  n3 b, ]8 S. I  u$ H, r5 L1 [. l' R0 y  M" E
那为什么不只检测CD56，还要再检测一个CD16

鸵鸵

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- e& K* H+ y1 i$ ]+ \
* d) b# U5 ~/ Z/ N# D$ G4 @- Q2 u& F请教如何提高CIK的cd3cd56的阳性率呢
, Q% M+ W; o" d% P1 u3 }http://www.stemcell8.cn/thread-79500-1-1.html
( A( o5 i/ _( Q  i  |- W: h# b你可以看一下这个帖子，就是针对你说的这个问题的

鸵鸵

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" [% g- `5 w- _9 k+ ^( Y+ F, O1 d/ s, c
CD3-/CD16+CD56+是NK细胞的特异性标志，是要一起检测的

鸵鸵

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% e- [; W# E  Y3 |; s3 o+ u  b9 D( p' l# q/ o. c# I
依据我们的培养经验，6*107/ml的初始接种密度是太高了，营养达不到，反倒会产生生长抑制，我们就和外周血CIK一样1-2*106的初始接种密度，后期补液根据生长状况进行调整，增殖效果还是很好的

pengxuleo

回复 海北 的帖子6 F- w( ]2 t4 w/ m4 Q( L

3 l; Z3 L' K5 g7 d1 f$ r% D2 v是可以的，CIK的主要效应细胞是CD3CD56双阳性的细胞的。但是一般情况下，都会检测一下T细胞、NK细胞等，所以就检测CD4,CD8,CD16等了

j1370033569

脐带血CIK细胞跟自体外周血培养差不多，只是离心速率及时间问题，比自体稍微大点，吸取白膜层大概能吸取5毫升左右。
! [" _8 Z" E) w% ^' M脐带血比外周血培养时红细胞较多，后面不一定死的完。密度一般是保存在1.0-2.0*10^6个/ml左右。