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楼主: 顾哲
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[请教] 复苏后的细胞没有长起来?? [复制链接]

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发表于 2015-9-9 08:42 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子& q2 X7 Y  e" [" \/ Y( I
- p' a5 S; ]1 s6 L
。。。。我再查查,您说的啥。谢谢您

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发表于 2015-9-10 09:01 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子5 d4 |  O: L9 N

: W: o7 f) Q( F嘿嘿,谢谢。

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发表于 2015-12-30 14:48 |只看该作者
长不起来说明细胞已经失活了,在冻存和复苏的时候都需要严格注意。4 a* S1 M( Q: F" d4 O1 y+ j. M
) \6 g% T. C" {0 W: ]# [  m& w
冻存+ \1 H6 P- [7 U- d% s5 Q
看你冻存的细胞的种类,有些用-80℃的冰箱就可以冻存好,有些则需要用液氮。冻存的速率也比较关键,最好用到冻存盒和冻存液
- Y- A2 i9 f8 e0 i0 D4 F3 R" V$ y- v' E! j
复苏7 t1 e% h1 P, R) \
复苏的过程要尽可能快速的把已经结冰的细胞的解冻到液体状态,1分钟之内吧,有恒温水浴锅会比较方便,没有的话就用手捂着,不要放到室温让细胞复苏的很慢。复苏后最好往细胞中加一些血清。一般情况下,冻存之后的细胞的活性往往是没有未冻存之前好的。
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发表于 2016-1-4 16:14 |只看该作者
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是不是复苏时用的时间太长了,在37°温水中1分钟左右溶解。也可能跟培养基和冻存是细胞死亡太多有关,建议复苏细胞后做一个计数看看是什么问题。
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