CIK细胞培养0、4、7、10、14天分别是什么样的？

本心

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! \7 Y# e! D% l1 z0 Q可以在D7加

ganggangtry100

CIK细胞培养0、4、7、10、14天分别是什么样的？？$ z3 y( k2 L' E4 ?9 a; `; \7 ~
个人觉得应该从两方面来说：+ ~- b6 `! W) R
1、细胞形态的改变! u' z9 \$ i. [0 y5 G/ |
      红细胞、单核细胞等杂志逐渐减少，细胞由圆形变成不规则较长细胞& V: q9 U, r% g( i5 ]
2、从细胞表型上6 E0 x/ h4 y/ \, V, D
    随着抗体CD3的加入，培养中的CIK细胞的 CD3+细胞会从起始的20-30% 很快变为 90%以上，由于IL-2、干扰素等因子的加入，CIK的主要效应细胞CD3+CD56+细胞也会从原来的1%左右慢慢变为30-70%左右。
7 K& q8 f( c' E" I2 e   概括起来，CIK从原来0天的红细胞、粒细胞、单核细胞、淋巴细胞等一群复合细胞，变为以CD3+为主的一群异质细胞。
8 P6 \( k# w$ K3 T: i   

地球外世界

回复 ganggangtry100 的帖子+ k; k. o/ S: v# p5 V$ g: w/ K
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非常感谢，解释的很清楚，明白问题在哪里了。我们现在能达到30-40%，如何能提高到70%？

momoenn

回复 地球外世界 的帖子1 W9 p% g7 D- g% U: u( r
! x% O% }3 w& w# u" i
你这个变化就是对的

地球外世界

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' b8 M# B6 c2 Q7 g# r2 _- I+ G  d& o# W2 s- a
变化，能详细描述一下你那里的实验培养情况吗？
2 u/ }! J5 e; c6 T: g/ ~" @

wuhuaguo88l

刚开始几天，细胞集落会比较小，也比较少，大概在第三天后，细胞会变大变多；四五天后，根据培养基颜色可适当扩瓶培养。

momoenn

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" I4 f' x7 d1 H7 K4 u
我们CD3+比例很高，但是CD56+比例很低，基本在3%左右，大约可能是什么原因导致的呢？谢谢

momoenn

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1 Z; r- l) I, f$ b  |
6 r' {' ^$ [0 V1 S分离当天算1天，第1-3天贴壁细胞较多，第3天开始，细胞开始慢慢成簇，少量抱团，这时形态变化也开始体现，开始出现梭状或者角状的细胞，到第5-7天，细胞抱团达到顶峰，梭状或角状细胞也越来越多，慢慢地细胞开始散开，单个细胞越来越多。

zhengjianwei521

这个你自己显微镜下看看吧，说不好啊，就是数量形态的变化

ganggangtry100

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7 Z1 ]7 m/ K7 J. ?" D4 ~
, ^2 w7 t. {" a' i, h   不知道你用的因子，培养基和样本来源和具体培养的方法，不好直接给你出办法。& P6 e- Q5 X7 |; p4 j- x
   现在CIK培养体系已经很成熟了，在网上搜集一下CIK培养方法，会有很详细的因子量的使用和培养基使用的，或者就用Schmidt Wolf 91年建立的经典的CIK培养方式，虽然有点老，但很不错，第0d，加入1000U/ml的人rIFN-γ，24h后，加入50ng/ml抗CD3和其他因子。每3d补充IL-2和新鲜培养基就可以。21天NKT 差的也得到20%了
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