CIK细胞培养0、4、7、10、14天分别是什么样的？

momoenn

回复 ganggangtry100 的帖子7 M( {3 Z- x" G- e; I
/ Y9 t' n) ~9 y
我们用的X-VIVO15  加的因子是IFN-r ，CD3和IL-2。加培养基是看细胞状态加。有没有可能是我们的因子效价不够呢

ganggangtry100

回复 momoenn 的帖子7 M/ n6 M1 o# S# I
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X-VIVO15  很好的培养基，你们CD3+细胞比较多，CD3抗体应该没有问题，看看IL-2和IFN-r在因子配置、保存上是否有失活（配置浓缩液-20度保存，平时工作液4度存放）可以尝试提高浓度或者三种因子一直添加，如果NKT还上不去，不要犹豫，换因子厂家吧~~~

momoenn

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1 ?( Q8 D1 W8 i& b
回复 ganggangtry100 的帖子
; \2 p/ J/ x: W& i( g9 j/ T5 p0 V1 \" ?- Q
IL-2失活的可能性很小，IFN-r和你说的保存方法一样。IFN-r一直添加的话，不会对细胞造成杀伤吗？如果可以的话，能不能试下请教一下.先谢下了

地球外世界

回复 wuhuaguo88l 的帖子
' A- N0 c+ g' v7 Y+ \9 r0 j- \' l# n0 ~9 R8 X' ]
谢谢

地球外世界

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8 v$ n& Y5 E, ?7 _9 p$ Y
3 Z2 B" i5 |4 m" j2 \非常感谢，培养阶段描述很详细，我再好好观察记录，观察是否与您的结果映照。

地球外世界

回复 zhengjianwei521 的帖子
4 a: z) p) m) D" i) [$ l/ c# \! o8 P
嗯，好的1 w. K* G! d- [3 x6 W# k

地球外世界

回复 ganggangtry100 的帖子5 B2 q; p  b* T# [( k8 {  A

6 F* q2 u% s3 z' o嗯，好的，现在用的是GT551培养基，用至少提前一天CD3和其他因子先包被培养瓶，再进行细胞培养，后期补加白细胞介素。这样培养，细胞增殖还是很慢，还在找原因。您觉得问题会出现在哪里呢？

ganggangtry100

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, K2 j' ~. g) X7 p% q8 l1 p3 P3 M
  CIK培养基中如果细胞生长慢，主要关注CD3和 IL-2的问题，他们两个是刺激细胞活化和和增殖作用，rIFN-γ等主要是增加细胞杀生活性的。( R' t! U0 L$ t# r
   看看包被浓度和白细胞介素的量是否够或失活，如果足量，只要他们两个因子，用1640细胞都能很好的增殖。

ganggangtry100

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% Q& U3 j5 t* C/ k/ H: D5 G1 G1 b. B0 S9 t4 v1 K/ d& @
  CIK培养基中如果细胞生长慢，主要关注CD3和 IL-2的问题，他们两个是刺激细胞活化和和增殖作用，rIFN-γ等主要是增加细胞杀瘤活性的。0 c( C, u- P% p" u0 U! Y. g+ j; K
   CIK本身也可以分泌rIFN-γ，个人认为不会对细胞造成不良影响。只是我的建议，各个实验室都有不同的培养方案，可以尝试一下。

地球外世界

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" M  ?1 M0 A' E* b: Y9 T4 K嗯，非常感谢，我调节一下，试试