骨髓分离后种植第二天出现的情况

121qwq

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! P, ^1 `" H1 z" {麻烦事又来了，最近几例分离骨髓后都出现不同程度的黑点，怀疑是污染。但是想不出来哪里出现的。用同样的培养体系培养其他没黑点的细胞照样没问题，请教大家有出现过这种现象吗？0 u6 o2 M- S: g6 d) o0 |

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tingting2113

“同样的培养体系培养其他没黑点的细胞没问题”说明所用培养液、培养瓶等没有问题，甚至环境也没问题，那是不是这几批样品被污染了呢？

121qwq

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  T$ h" h" z( ^1 W: }7 Y5 _6 Y" [1 D' U& K% g
我问过取骨髓的朋友，问过流程基本上没什么问题，都是用新的，但是具体怎样取我也没参观过，有点血腥，不敢去

wuzhoulingxiao

感觉不太像细菌污染，细菌会导致培养基黄、浑浊，细胞大面积漂浮。感觉像细胞、组织碎片太多或黑胶虫污染。

疯子

我之前做培养的时候也出现过这种情况  当时还以为是污染  但是有坚持养了几天  勤换着培养基  黑点 就都没了  后期也没有异常 不知道是什么情况
7 t9 t; x3 a# I9 `/ u  {' S+ K

caustic

一旦在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，
  T1 e  G) R; M- L' S( e微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果培养基未变黄，只是生长状况不好，可能是黑胶虫污染，避免黑胶虫的污染，首先要确定血清是否新鲜，还有血清不是反复冻融。
& D, t/ L! t. y7 c如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：
* [% ~$ q. w: s; ?; F3 x  （1）细胞生长过老，破碎的细胞残骸；- O3 e5 @& Y" D1 O2 Q
（2）血清质量不好，反复冻融的结果；
& ?/ \/ X0 r( d9 Z7 H$ c% s5 C（3）配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；" O4 e9 U( m' Y* ^5 |1 N
（4）配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点；: Z/ S1 p# ?5 U. @" u0 l
（5）培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。

genhaoxin

是培养人的骨髓吗？用的培养体系一样，加不加自体血清？看着不像是污染，换液时洗涤2次，继续培养。

121qwq

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3 `3 s8 w" r/ h人的

playboy723

细胞碎片或者是其他的代谢废物，一般换液后加大血清浓度，细胞状态好了后自然会消失的。可以考虑半量换液