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我最近一直在诱导分化MSCs,诱导成骨分化成功,可是为何我诱导成脂细胞不成功呢   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-4 12:37 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-7-5 00:56 编辑
3 u! s  y3 n) r7 R9 a3 ?* h$ ~* k- ^& E# o( F4 w$ p
大家好!我最近一直在诱导分化MSCs,诱导成骨分化成功,可是为何我诱导成脂细胞不成功呢,我的诱导方案如下:
) Z* q' C. {$ J% T. N' ]9 }, X$ h6 Z      1μM地塞米松+10μM胰岛素+0.5mM IBMX+100μM吲哚+10%FBS+L-DMEM。请问大家,传统用诱导培养基和维持培养基以2+2形式更换,但是我查过很多中文文献,英文文献只是说用诱导培养基每周更换2次培养基,请问,到底是哪种,还有我用油红染色,以裴雪涛出版的干细胞实验指南的操作进行,结果一次都没染出来,请问甲醇可以固定脂肪细胞吗?谢谢大家帮忙解决这个难题吧
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沙发
发表于 2012-7-8 23:30 |显示全部帖子
请问用4%多聚甲醛固定,为何细胞都脱掉了呀
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藤椅
发表于 2012-7-9 18:12 |显示全部帖子
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% H% Z6 |6 W% K+ q
2 e! m  D1 H( H, E谢谢您了,版主您好!帮忙分析一下吧,为何我在诱导成脂细胞过程中,还没到2w就有那么多脂肪滴一样的上浮,并且用油红O染色,可是结果经常出现一大片黑色的,我都不知道那些是什么,因为过去实验室没做过这方面,我是各路求人。我的成脂诱导培养基是低糖DMEM+10%FBS+0.5mM IBMX+1μM地米+10μg/ml胰岛素。我用其进行诱导21天,可是细胞变少了,并且脂滴没有了,一染色一大片黑,我用油红O 0.5%,染色10-15min;目前我查文献看很多人用3+3;2+2;我尝试用诱导和维持培养基做,可是每次换成维持培养基结果第二天很多似脂滴一样的飘起,我用油红O染色结果飘起的出现很多脂滴染色,真让我郁闷,不成功我誓不罢休,可是我需要大家伙帮忙,谢谢了
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板凳
发表于 2012-7-11 14:22 |显示全部帖子
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' o) h' z' D; b6 D( Q8 s3 h0 D0 }" O0 L+ T2 k/ E- n, g
对了,请问国内有哪些著名的干细胞类公司,我想毕业后到他们那里工作,可以帮忙介绍一下吗

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报纸
发表于 2012-7-23 17:54 |显示全部帖子
我在配制诱导剂时,脂溶的我用DMSO,水溶的用超纯水。应该每问题。胰岛素我用水溶解的
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地板
发表于 2012-7-23 17:55 |显示全部帖子
回复 luckywen 的帖子( H( `0 T- k9 c

* c" I3 B7 \1 Z& h; }( y  m我在配制诱导剂时,脂溶的我用DMSO,水溶的用超纯水。应该每问题。胰岛素我用水溶解的 * ?" T3 c) v! R7 e% c& R' P2 y$ ?
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