mSSC体外培养求助

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养了半年mSSC，由于实验室刚建立这个平台，没有太多经验，而且曲细精管移植还没有做过。这半年来体系不稳定，养SSC出现过各种形态，发些照片求有经验的前辈们鉴定一下。6 n9 t; Y* e$ K3 m" s/ B* J' ^% c1 v

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吴梦 发表于 2016-10-19 20:15
# M6 M4 Q8 n9 I- G7 |您好！请问feeder细胞对干细胞的影响会非常大吗？用MEF好，还是STO比较好。各位大神是如何处理的，是选择用 ...

( {; e. j# C! J0 e( @8 P; dfeeder肯定是非常关键的 丝裂霉素C处理比较稳定成熟

细胞海洋

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" I/ L# X2 [' L% u9 l2 J建议你发新帖提问

吴梦

您好！请问feeder细胞对干细胞的影响会非常大吗？用MEF好，还是STO比较好。各位大神是如何处理的，是选择用丝裂霉素还是放射线呢？各有什么优势呢？

w343989328

回复 xxhui 的帖子
- Z7 s* J- w9 k% W4 g" h6 z8 h- ?2 H8 I5 a% P, W5 q- S! \, @9 ]
我的滋养层是其他实验室给的STO细胞系。后来改用MEF了

细胞海洋

回复 xxhui 的帖子
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xxhui

回复 w343989328 的帖子
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你好，我现在在养SSC，看到了你的帖子，我想问下，你说的饲养层不行指的是什么？是太稀或者太密，或者其他原因？

w343989328

回复 hai344239012 的帖子
* M+ o0 l$ R9 A+ |1 p4 H
% I+ H6 j- y' @嗯，谢谢你！我现在已经可以养出来了。上面那些都是失败的范例，确实是滋养层太差了

hai344239012

我觉得你的SSC养得非常的不好; ?+ Q) p1 Y7 r/ g/ _
可能 feeder 做的不好 建议重新做做 做过支原体检测吗？

我爱火热的冬天

流式检测你用磁珠分选的细胞的结合率，这个可以用美天旎的cd90-fitc，我不知道有没有必要用其他抗体进行检测，因为可以做免疫细胞化学进行检测，只是得不到比例，用流式可以得到比例，我做的思路和你的也差不多，只是不知道WB IF是如何检测的，之前看文章没有看到用这种方法，对了，你们的实验室在哪里，移植技术成熟吗？只是做小鼠的会不会太没意思，毕竟国外在小鼠上非常成熟了