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楼主: gxbzjznn
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[其他类别] 跑胶出现三条带? [复制链接]

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包包
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发表于 2016-1-12 13:15 |只看该作者
本帖最后由 云飘过的思念 于 2016-1-12 13:16 编辑 ; x/ F# Q& T4 V' G

5 D4 l, B# Z4 y5 o6 m% E条带的问题相信楼上的各位老师已经帮您分析得很清楚了,我不再多说,对于胶染法个人认为不需要像这样过曝光,这样的话会提升了背景值,若染料为EB的话会发现在紫外下仍有染料的部分呈现粉红色,反观整体胶的轮廓不难发现下沿的轮廓不清晰,这样的曝光强度会对某些成像分析定量有影响,建议楼主能够看清条带及非特异情况和二聚体的强度为准尽量的降低背景值的干扰,依靠分析软件标定的定量条带亮度对样品浓度进行定量分析。
. y* z+ v. M* R4 O1 w略有拙见,各位勿喷啊
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发表于 2016-1-12 10:12 |只看该作者
回复 gxbzjznn 的帖子4 |# x( N8 P' K5 X. B- Z8 I
+ J( l) l7 T) o% p8 @
中间的是引物二聚体,因为在50左右,你的引物大概是20-30bp吧,最小面的应该是你的引物单链,说明你PCR的时候引物浓度太大,导致引物染色和二聚体特别明显。建议降低PCR时引物浓度。( C# d! |+ l3 i1 P! x! b+ @4 y
marker还是挺不错的,是哪个品牌的?
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地板
发表于 2016-1-12 09:19 |只看该作者
同意thinktank的说法,最下面的条带是引物二聚体,中间的是非特异性扩增
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报纸
发表于 2016-1-12 09:18 |只看该作者
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最小的那个是引物二聚体
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板凳
发表于 2016-1-12 08:28 |只看该作者
50bp的是dimer吧,更前端的那个,猜不出
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藤椅
发表于 2016-1-11 23:08 |只看该作者
最下面的一条带是引物二聚体,中间的可能是非特异性扩增。
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沙发
发表于 2016-1-11 23:06 |只看该作者
楼主没有交代清楚问题。
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