CD3抗体包被vs直接添加

醉心科研

关于CD3单抗是包被好还是直接添加好，论坛里已讨论过好几个帖，这里不涉及这个问题。
! Z5 u0 ]* d. t( W" T3 R/ Q就是有一点不明白，包被是接种之前就包被好了，而直接添加是伽马诱导24h之后加的。那么这两个时间点不一样啊，哪个时间添加更好呢？

繁华落尽

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  R+ D9 z/ _/ q6 g( r7 A8 W
4 k# d9 e( b8 J7 u3 ~( `5 ^: j6 w这个实验我们做过，CD3正常包被的时候都是在接种之前包被，时间大概为接种前12h，包被的效果和不包被的效果没什么区别，唯一就是包被后的细胞，前期易贴壁生长.另外也可以采纳用血浆包被或者是纤维连接蛋白FN
( D) l. J7 [. i! l9 [0 }. B9 K

Sarge

效果是差不多的，包被太费抗体

醉心科研

可能我问的不够清楚。我关心的是加入时间的问题。- Y1 V4 o- A6 a/ I$ O
按照包被的时间算，相当于在接种0h时加入的anti-CD3，而一般加都是24h后再加。这样算来，是不是直接在接种时加入溶解好的anti-CD3也行呢？

zerollx

回复 Sarge 的帖子: I. T" D# L( [- g
! a# Q/ @" S" N( Y; P* x
添加可溶性抗体CD3和CD28的浓度一般是多少啊; ]  o; s3 b& t, Q7 S' Y

Sarge

浓度得自己摸条件，不同的品牌和培养体系用的浓度都是不一样的

Sarge

一般是在50-100ng/ml

Sarge

回复 zerollx 的帖子2 _$ I& p2 R- J+ G* S- s

, {. \9 `$ w' P; D3 M7 b
$ _' i' J1 Q* d浓度得自己摸条件，不同的品牌和培养体系用的浓度都是不一样的

a276038921

感觉包被的细胞后期生长的要比直接添加的好，而且不容易结团

baoweih

回复 醉心科研 的帖子$ V6 r) |; t0 ]* {6 o

/ t7 ]! f; ^" U' h* H/ P可以接种时加配好的CD3培养基，两天后再加含IL-2的培养基，这种方法细胞没有包被的生长得快