CD3抗体包被vs直接添加

醉心科研

关于CD3单抗是包被好还是直接添加好，论坛里已讨论过好几个帖，这里不涉及这个问题。+ h; {8 c0 _, c% k* M# O
就是有一点不明白，包被是接种之前就包被好了，而直接添加是伽马诱导24h之后加的。那么这两个时间点不一样啊，哪个时间添加更好呢？

繁华落尽

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7 k, ?- R6 j1 v这个实验我们做过，CD3正常包被的时候都是在接种之前包被，时间大概为接种前12h，包被的效果和不包被的效果没什么区别，唯一就是包被后的细胞，前期易贴壁生长.另外也可以采纳用血浆包被或者是纤维连接蛋白FN9 E5 J% m( c/ {6 K# l+ q9 v  e

Sarge

效果是差不多的，包被太费抗体

醉心科研

可能我问的不够清楚。我关心的是加入时间的问题。% |% k4 b& j% J: {( \
按照包被的时间算，相当于在接种0h时加入的anti-CD3，而一般加都是24h后再加。这样算来，是不是直接在接种时加入溶解好的anti-CD3也行呢？

zerollx

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添加可溶性抗体CD3和CD28的浓度一般是多少啊
3 n+ c7 ~7 R& c. J

Sarge

浓度得自己摸条件，不同的品牌和培养体系用的浓度都是不一样的

Sarge

一般是在50-100ng/ml

Sarge

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浓度得自己摸条件，不同的品牌和培养体系用的浓度都是不一样的

a276038921

感觉包被的细胞后期生长的要比直接添加的好，而且不容易结团

baoweih

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) Y) @1 r9 i( G# {2 c/ |  N0 U7 N可以接种时加配好的CD3培养基，两天后再加含IL-2的培养基，这种方法细胞没有包被的生长得快