求救：冻存后间充质干细胞不贴壁也不是死细胞

chslyx

年前收了一些干细胞，用90%血清+10%DMSO的-80冰箱冻存了一个月，取出后清洗三遍，之后就是细胞就是不贴壁也不死，求救各位大虾

greenhand101

有没有支原体等的污染？培养液的PH是否过碱？

1276916287

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' @1 p! H6 _% }; n
, ]% ^- ~0 _' Z, |冻存液没有问题，但是细胞冻存及复苏的时候是否做到了慢冻快融很关键，特别的干细胞，冻存的时候有条件的话可以用程序降温仪，至少得用程序降温盒

1276916287

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0 E9 Y6 }7 _  t' h- H, ^+ w冻存液没有问题，但是细胞冻存及复苏的时候是否做到了慢冻快融很关键，特别的干细胞，冻存的时候有条件的话可以用程序降温仪，至少得用程序降温盒

abcstem

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确定培养条件和冻存前一样吗？试剂是否有换过？这种情况我觉得应该是培养液的问题，重新配培养液吧。

saliai2016

不贴壁的话应该是死了吧

biluolinyu

血清和冻存之前的尽量保持一致，另外不贴壁估计细胞也快不行了吧。。。

biovictor

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/ C9 s( Z# m1 B0 c: G
+ m. ~$ d9 y- v# n楼主，做个PI染色就知道是不是死的了！很简单

chslyx

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8 p3 b/ c" I. O& W$ N1 T
9 S) k# V5 V, V% n9 \染色后都没有死
1 w. X& _& Q5 ?+ O) Q; s

chslyx

回复 biluolinyu 的帖子1 I6 }" D, U7 H

. i  ~) M7 f( Z, f" |血清和培养基都是一样的