关于CIK培养过程中产生的絮状物，求高手指点

seergene

最近有一例血脂特别高的患者，血液分离后，血浆里的脂肪特别多，即使灭活离心后仍是如下图。培养时用了T551培养基，加入了人血白蛋白。前2天都正常，第3天传入175培养瓶后开始出现絮状物，细胞都聚集到一起。此絮状物不是正常CIK增殖过程中产生的细胞团，无法吹散。细胞生长状态受到严重影响，增殖速度变慢。哪位高手遇到过类似现象，跪求解决办法，最好可以让细胞恢复到正常状态，谢谢！！！
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seergene

最近一直在观察，最近2天絮状物增多，但是单个的细胞很少。

小沙弥敲木鱼

养养看吧，血浆油脂太高，建议不要加了。絮状物是细胞么？

细胞海洋

请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！8 S* y' x! b& C
http://www.stemcell8.cn/thread-69130-1-1.html- c' z1 R  P2 l3 w

seergene

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: Y& n# B, x/ n4 R" W& d0 G& h$ ^1 U. |
是细胞，形态上看起来有点像CIK，但不确定。

cloudycity

1.不是CIK是死细胞团····会粘住正常细胞，越养越惨····很难再长了···用100微米的滤网过滤，然后再把体系降下，培养密度提高来试试···# T6 x  ^0 o& m
2. 吸白膜层的时候尽量只吸那一层，其他的都不要了。
+ k: p- `( u* F0 x+ ]3.我觉得是其他的一些免疫细胞（巨噬、单核、粒细胞）死掉后会放出的蛋白网···（猜测···）

biluolinyu

首先要确保同一批次的培养瓶没有问题，有些时候实验中用到的耗材有些问题会导致细胞出现上述情况
$ ~, ~4 B* f4 \( ~& t0 V! X其次楼主不要再添加血浆了，可能是由于血浆内的油脂过高导致的，如果必须要添加血浆可以尝试-20保存后4度融化，然后在离心取上清
. J  ?+ |7 E* S! s, u; V6 D这种情况的絮状物应该不是粒细胞死后释放出的遗传物质造成的，如果是其他细胞死后造成的絮状物，会比这个长，基本在第二天就会出现
/ F" o: P' {, d+ Z如果楼主5天之后仍然觉得培养效果不好，或者是血浆处理后仍然无法继续使用，可以将培养基更换为x-vivo

biluolinyu

另外楼主的抗凝剂是什么，枸橼酸钠还是肝素

seergene

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# L0 ]$ B5 K0 R1 |; B谢谢了，今天会处理一下试试，有消息会随时更新的。

seergene

回复 biluolinyu 的帖子. w9 Z- I8 z5 u' V' E$ }2 _

7 X2 J7 a! Z" ]) n' R# U! J自体血浆始终没加，加了点白蛋白，也不多。应该不是死细胞导致的，絮状的东西是第3天才出现的。