外周血细胞分离效果不好

小沙弥敲木鱼

外周血放置在四度冰箱4小时左右采取分离细胞，步骤都按正常的走，可是分离的白膜层和上清液分解线不清晰，没有之前的立即做的效果好，碰到这种情况怎么处理？？？？谢谢

juzideds

在加ficoll前混匀一下，试试

cloudycity

1.把血液样本和Ficoll都静置到常温再用
' o( P! _0 f" `3 N2.用新的Ficoll, v' a& S% E4 G! f5 ~' C( Y, R( [4 g! S

baby00000003

把buffy coat和上层清液都抽出来，混PBS，混匀了离心

biluolinyu

如果采血后到实验室可以分离这一个时间段不是很长，建议不要存放在4°，直接放于室温，这种情况下分离效果会好一些。另外就像楼上说的那样，确保血液和ficoll复温后在使用，或者ficoll直接37预热

zhengjianwei521

放在4度的时间有点久了，最好立即处理，三四个小时不用放冰箱，拿出来最好到常温在做！

拉二胡的拉尔夫

1.血液保存的时候最好有摇床。
; a+ l: h. R, l9 K! V2.将血液放置常温在操作，不要加热哦。4 I# C! n, D! @/ @1 Y! a
3.加大生理盐水的稀释倍数。  W! \" e% F9 d& z$ @0 t+ Y. F
4.挽救措施，将红细胞上面的细胞都收集起来，加生理盐水或PBS混匀，然后加ficoll重新分离。
4 i9 V9 p1 \) P2 c* C希望能帮到你

心蕾

1、血液样本和Ficoll都恢复到常温；
4 r. [  H& Q4 C5 ?8 y1 L' l0 s. c2、Ficoll缓慢加，尤其是刚开始是一定要慢；
. }. A2 h  N. e; O3、离心机的离心力要合适。

吕小松

不要放在4度保藏，ficoll要平衡到室温，离心机参数要适合，我觉得主要问题还是血放在了冰箱了

why77yhw

回复 拉二胡的拉尔夫 的帖子! W1 \' I4 ^# [" U% B2 ~# H1 [
, A" c/ u6 a; B8 r% z6 n
如您第4条所说，这种情况您实际操作过吗？效果好吗？是否需要再吸点红细胞层靠上层的一点点细胞，考虑到可能会有部分白膜未分离出来，求指点~谢谢