DC细胞的成熟度问题

gengtongyu521

DC细胞培养过程中，本来细胞数量就不多，用TNF-a促成熟以后，还有好多细胞贴壁，DC细胞成熟度不够，查阅资料后，有人用TNF-a,IL-6和PEG-2促成熟？各位大神有什么建议呢？希望多多交流啦。

baby00000003

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% g% `" M  v: b! I: R& `: D) H5 k( ^倒是听说过有用.....应该是PGE-2吧，prostaglandin E2～
  `4 j5 y% d5 b检测的什么marker呢？CD14/CD86？

Tracy-Cui

我也是用TNF-a促进成熟，是会有一些细胞贴在壁上的，可以用移液枪轻轻吹打，成熟的DC就会悬浮起来。/ f5 P; F0 ~7 d3 u6 i' i) w

5 F7 J5 F6 z% b% B8 V2 f4 s你也可以先收集悬浮的细胞，然后用缓冲液轻轻吹打贴壁的细胞，将这部分细胞上流式检测，看看是否有DC。- K; m6 n0 \+ v1 N

+ c; }; S/ i: q+ i% x6 |  N希望对你有帮助！

yaolinzhang

回复 gengtongyu521 的帖子- p& R: t" B  }" R9 a  J
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个人感觉这和TNF-a的浓度及培养时间有关，建议楼主调整一下

994545

我的DC有个别在加了TNF后会明显转化成纤维样细胞，·········求解！！！！！大神      不知是不是前期的因子浓度高了？

拉二胡的拉尔夫

你的培养周期是多少？你GM和白介4浓度是多少？培养基品牌？出现成纤维状是正常情况，添加肿瘤刺激物也会提高DC成熟度8 b" u1 @6 k3 t/ Q0 U3 j

Tracy-Cui

回复 994545 的帖子' W8 e6 g. z# m+ g/ X/ @4 b: c7 D3 e

: t; Y9 a5 I( `8 E1.DC是树突状的，在镜下观察时有些容易被认为是纤维样，准确的还是建议流式检测  t1 E; }. d  Z1 d: B2 l9 I
2.细胞因子浓度的问题，建议做一下单因素或者正交试验，看看在其他浓度下是否有这种状况。
. B! l! Q* s) y/ z' g
) M( ]$ N( R: t0 {% T/ ]希望对你有帮助

我是传奇

DC培养一直都是一个难题，不单是数量上，纯度要求也不易做到，大家所谓的贴壁的或是纤维样的我个人感觉更像是巨噬细胞，在现行大多数培养过程中大家都加入TNF-α促成熟，但是你们有没有想过在这之前要负载抗原呢？个人认为CD40L较TNF-α对存进DC成熟更有效。

momoenn

加入CIK细胞也可以促进它的成熟

六弦七品

我们是用腺病毒把肿瘤抗原基因转载到DC里，让肿瘤抗原在DC里面表达，还有载入一些免疫佐剂，促进DC成熟。这年头，不对细胞进行下基因改造都拿不出手。