DC细胞的成熟度问题

gengtongyu521

DC细胞培养过程中，本来细胞数量就不多，用TNF-a促成熟以后，还有好多细胞贴壁，DC细胞成熟度不够，查阅资料后，有人用TNF-a,IL-6和PEG-2促成熟？各位大神有什么建议呢？希望多多交流啦。

baby00000003

% U+ j) e! M8 ^' d
: F! D% c0 i3 b1 o& ~
倒是听说过有用.....应该是PGE-2吧，prostaglandin E2～& ?& A7 m1 ]! t9 E2 \6 T6 T
检测的什么marker呢？CD14/CD86？

Tracy-Cui

我也是用TNF-a促进成熟，是会有一些细胞贴在壁上的，可以用移液枪轻轻吹打，成熟的DC就会悬浮起来。
; n( c* M3 K- I( r9 a
. v& H& i8 X2 n你也可以先收集悬浮的细胞，然后用缓冲液轻轻吹打贴壁的细胞，将这部分细胞上流式检测，看看是否有DC。
; }5 B. H9 M/ ^% b6 H' V; O! q. B2 K# x: ?
希望对你有帮助！

yaolinzhang

回复 gengtongyu521 的帖子
/ R: {: k6 x) @. A( E
* J( e, v' W3 n; x$ p个人感觉这和TNF-a的浓度及培养时间有关，建议楼主调整一下

994545

我的DC有个别在加了TNF后会明显转化成纤维样细胞，·········求解！！！！！大神      不知是不是前期的因子浓度高了？

拉二胡的拉尔夫

你的培养周期是多少？你GM和白介4浓度是多少？培养基品牌？出现成纤维状是正常情况，添加肿瘤刺激物也会提高DC成熟度
  _- W" V1 |  ]8 c1 {" R

Tracy-Cui

回复 994545 的帖子
0 V% B) T/ F& d5 r  i  |" p) V- x( m2 a/ v" ?/ z" J0 q3 C7 f
1.DC是树突状的，在镜下观察时有些容易被认为是纤维样，准确的还是建议流式检测
& B3 M) l5 j0 H& O& y0 V, Q! Y. f9 r2.细胞因子浓度的问题，建议做一下单因素或者正交试验，看看在其他浓度下是否有这种状况。
7 Q% `1 N2 k- ]% s: m2 `, l. V0 n
# f5 y! {3 W  X% O( E4 A6 X希望对你有帮助

我是传奇

DC培养一直都是一个难题，不单是数量上，纯度要求也不易做到，大家所谓的贴壁的或是纤维样的我个人感觉更像是巨噬细胞，在现行大多数培养过程中大家都加入TNF-α促成熟，但是你们有没有想过在这之前要负载抗原呢？个人认为CD40L较TNF-α对存进DC成熟更有效。

momoenn

加入CIK细胞也可以促进它的成熟

六弦七品

我们是用腺病毒把肿瘤抗原基因转载到DC里，让肿瘤抗原在DC里面表达，还有载入一些免疫佐剂，促进DC成熟。这年头，不对细胞进行下基因改造都拿不出手。