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急求:从人血细胞诱导培养ips的protocol及文献 [复制链接]

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楼主
发表于 2016-8-9 22:55 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
实验室只有人的血细胞没有皮肤组织细胞,看文献上都有从皮肤细胞生成fibroblast再诱导ips,所以急求从人血细胞诱导培养ips的protocol及文献,多谢各位高手
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沙发
发表于 2016-8-10 12:44 |只看该作者
人血细胞有多种 细胞,红细胞没有细胞核,不能重编诱导,免疫细胞可以的,加入四个因了的慢病毒,再加入VC和VPA 换上ES 培养基就可以的,这个很成熟了,都差不多
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藤椅
发表于 2016-8-10 22:15 |只看该作者
回复 anning111 的帖子
% Z1 r6 {4 J, ]8 ^+ x" L" ^% c5 l0 W9 v- ]! U& \& j# }5 j+ U
您好,我确实是新手,请问有没有相关的protocol或文献,十分感谢

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板凳
发表于 2016-8-11 12:48 |只看该作者
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Induction of pluripotent stem cells from fibroblast' [: s, K6 }+ U# A
cultures$ L! L  p" z: y% N

1 O5 e; w& {# H  f( T" wKazutoshi Takahashi, Keisuke Okita, Masato Nakagawa & Shinya Yamanaka
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报纸
发表于 2016-8-12 00:10 |只看该作者
anning111 发表于 2016-8-11 12:48 ) i& [: s$ b* w$ ?( e
Induction of pluripotent stem cells from fibroblast9 N1 B+ o! F# p1 {
cultures
: k$ d! M) X& }+ ~7 H, t
这个还是从皮肤细胞诱导啊,我想说有没有用血细胞诱导的
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地板
发表于 2016-8-12 09:03 |只看该作者
有的,不过比较难做,因为从血细胞诱导出没有遗传记忆的ipsc需要扩增血液中的有核红细胞,有核红细胞在血液中含量很少,所以第一步要突破这个难关。
2 a( G% m/ s; b然后用episomal的方法就可以很有效的获得ipsc了。从T细胞或B细胞中获得ipsc也可以的,但是需要用病毒,而且获得的ipsc也是有T细胞遗传记忆的。
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发表于 2016-8-12 21:45 |只看该作者
pauldong 发表于 2016-8-12 09:03
; g9 V$ u. E! k) l, ^* B; e有的,不过比较难做,因为从血细胞诱导出没有遗传记忆的ipsc需要扩增血液中的有核红细胞,有核红细胞在血液 ...

3 q/ {9 c/ E1 `3 g# B1 H" l5 _给个这方面protocol或文献行吗

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发表于 2016-8-15 09:00 |只看该作者
行行行,我发几篇文章你看,
7 z1 p, U5 _( P& C) H% K- F1,Chou BK, Mali P, Huang X, Ye Z, Dowey SN, Resar LM, et al.
# f  r2 D  {) z3 B: dEfficient human iPS cell derivation by a non-integrating plasmid
* R3 {& N, o' W, u# pfrom blood cells with unique epigenetic and gene expression signatures.
6 O# w$ c. s( W, D7 `: |& ~( gCell Res 2011; 21(3): 518-29.
- h( @& e+ F7 B2Kim K, Doi A, Wen B, Ng K, Zhao R, Cahan P, et al. Epigenetic8 s( I% }' Q5 m- B2 h
memory in induced pluripotent stem cells. Nature 2010;* J* p* y) l7 a  i1 M( E
467(7313): 285-90.
8 w* P) B5 D8 H& C: r7 {3Loh YH, Agarwal S, Park IH, Urbach A, Huo H, Heffner GC, et al.
# M5 y6 o* }6 H  ^  _9 \# A7 ?Generation of induced pluripotent stem cells from human blood.5 e- J+ E) [$ }4 y4 M5 X) B1 s
Blood 2009; 113(22): 5476-9.
- L; S) ^! J* u- P; l4Haase A, Olmer R, Schwanke K, Wunderlich S, Merkert S, Hess5 K; i. R5 `3 k5 J1 D* u/ J$ C
C, et al. Generation of induced pluripotent stem cells from human2 x: n9 b, B) o1 l& o
cord blood. Cell Stem Cell 2009; 5(4): 434-41.
/ I' V5 ]/ @2 g; j4 b+ M. ^5Giorgetti A, Montserrat N, Aasen T, Gonzalez F, Rodríguez-Pizà I,2 D; B! v4 e# \
Vassena R, et al. Generation of induced pluripotent stem cells from
6 |' A; x" H5 z/ E2 H* T) m2 fhuman cord blood using OCT4 and SOX2. Cell Stem Cell 2009;
! i& z! J) T. w) X$ n3 V' b1 ^记得多给我评点分哈,谢谢了,有什么问题可以问我哈/ K4 ~2 c0 {. v' e* T
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发表于 2016-8-15 22:57 |只看该作者
anning111 发表于 2016-8-15 09:00
$ [! X, q  Y2 m1 Y+ y& |- v. c行行行,我发几篇文章你看,( A" @; \; K6 t% F. Z& |* t
1,Chou BK, Mali P, Huang X, Ye Z, Dowey SN, Resar LM, et al.
( W+ B. m' _/ P" wEfficient ...

* C/ R$ c7 D; X' \( w太感激了,我先看看

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发表于 2016-8-15 23:14 |只看该作者
anning111 发表于 2016-8-15 09:00 $ O$ {/ u$ M* A% y7 [2 Z! k
行行行,我发几篇文章你看,5 |9 A% N# M# B% t% G! ~' F0 w# k- g
1,Chou BK, Mali P, Huang X, Ye Z, Dowey SN, Resar LM, et al.
% L2 L8 [  o; l% ?: gEfficient ...

6 H2 |0 _. D. x0 [现在级别太低评不了分,但回头一定补上
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