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急求:从人血细胞诱导培养ips的protocol及文献 [复制链接]

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楼主
发表于 2016-8-9 22:55 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
实验室只有人的血细胞没有皮肤组织细胞,看文献上都有从皮肤细胞生成fibroblast再诱导ips,所以急求从人血细胞诱导培养ips的protocol及文献,多谢各位高手
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沙发
发表于 2016-8-10 12:44 |只看该作者
人血细胞有多种 细胞,红细胞没有细胞核,不能重编诱导,免疫细胞可以的,加入四个因了的慢病毒,再加入VC和VPA 换上ES 培养基就可以的,这个很成熟了,都差不多
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藤椅
发表于 2016-8-10 22:15 |只看该作者
回复 anning111 的帖子- q9 Z9 d, L* O

3 @, p' W6 U( U' L您好,我确实是新手,请问有没有相关的protocol或文献,十分感谢

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板凳
发表于 2016-8-11 12:48 |只看该作者
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Induction of pluripotent stem cells from fibroblast
2 c" e! _+ t1 Kcultures
1 m/ a! t4 K% W6 m" x6 ?, x
% J. E& a1 Q& U- J% cKazutoshi Takahashi, Keisuke Okita, Masato Nakagawa & Shinya Yamanaka
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报纸
发表于 2016-8-12 00:10 |只看该作者
anning111 发表于 2016-8-11 12:48 9 Y+ S5 e. C6 Q4 x6 U
Induction of pluripotent stem cells from fibroblast
1 U* t6 T& _; q4 ?8 Ecultures

. I) T! c& g, z, n这个还是从皮肤细胞诱导啊,我想说有没有用血细胞诱导的
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优秀会员

地板
发表于 2016-8-12 09:03 |只看该作者
有的,不过比较难做,因为从血细胞诱导出没有遗传记忆的ipsc需要扩增血液中的有核红细胞,有核红细胞在血液中含量很少,所以第一步要突破这个难关。( f6 ~: t  p1 S. Q3 z7 ]( S5 D9 P
然后用episomal的方法就可以很有效的获得ipsc了。从T细胞或B细胞中获得ipsc也可以的,但是需要用病毒,而且获得的ipsc也是有T细胞遗传记忆的。
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发表于 2016-8-12 21:45 |只看该作者
pauldong 发表于 2016-8-12 09:03
' p& t- z# n* S& G0 t! }0 R有的,不过比较难做,因为从血细胞诱导出没有遗传记忆的ipsc需要扩增血液中的有核红细胞,有核红细胞在血液 ...

& a' Z" d/ r' _" V0 {& Q5 P- d给个这方面protocol或文献行吗

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发表于 2016-8-15 09:00 |只看该作者
行行行,我发几篇文章你看,' x2 ]! j. C/ _9 k
1,Chou BK, Mali P, Huang X, Ye Z, Dowey SN, Resar LM, et al.
# v$ v" u8 s! |; u+ g7 B, B. REfficient human iPS cell derivation by a non-integrating plasmid
* W5 K# W& ]- z) Q5 gfrom blood cells with unique epigenetic and gene expression signatures.$ r+ Z3 u! \9 `' a. C6 G# ]8 n8 o
Cell Res 2011; 21(3): 518-29.
3 E% ~) {4 F' Y2Kim K, Doi A, Wen B, Ng K, Zhao R, Cahan P, et al. Epigenetic  y  P' l% ]7 n' b% t7 t7 _
memory in induced pluripotent stem cells. Nature 2010;
7 h& z3 G% ]  Y. S% Z+ V* i467(7313): 285-90.
; E6 e, \$ r; _; R/ t0 R3Loh YH, Agarwal S, Park IH, Urbach A, Huo H, Heffner GC, et al.
* D0 t- |0 q0 q4 oGeneration of induced pluripotent stem cells from human blood.
" ?- q2 a- c) k4 SBlood 2009; 113(22): 5476-9.
+ q) _# s- B; ^; S4 l4Haase A, Olmer R, Schwanke K, Wunderlich S, Merkert S, Hess
  b) d5 @  u/ t; z+ ?' aC, et al. Generation of induced pluripotent stem cells from human
" `  J1 I5 S+ R1 |; g6 o/ ucord blood. Cell Stem Cell 2009; 5(4): 434-41.: f1 j9 I" \: `( I, ?9 s
5Giorgetti A, Montserrat N, Aasen T, Gonzalez F, Rodríguez-Pizà I,
* }% s: j: R9 x2 l7 fVassena R, et al. Generation of induced pluripotent stem cells from- L; e7 X% ?- C: v$ P
human cord blood using OCT4 and SOX2. Cell Stem Cell 2009;
- ], }# s4 Y0 e1 d+ @记得多给我评点分哈,谢谢了,有什么问题可以问我哈$ s( j; i$ b5 R& G
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发表于 2016-8-15 22:57 |只看该作者
anning111 发表于 2016-8-15 09:00   e2 _5 I% M5 Y$ |
行行行,我发几篇文章你看,
9 T' n$ O* V8 |1,Chou BK, Mali P, Huang X, Ye Z, Dowey SN, Resar LM, et al.
* G; j* Y2 ~* ?$ k  ^0 LEfficient ...
( `! s4 S2 ]6 h. \# U# i3 H
太感激了,我先看看

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发表于 2016-8-15 23:14 |只看该作者
anning111 发表于 2016-8-15 09:00
1 e9 X- P# G9 H5 h0 G行行行,我发几篇文章你看,- O& x: E& [- U3 W0 Q8 g6 L
1,Chou BK, Mali P, Huang X, Ye Z, Dowey SN, Resar LM, et al.
+ z' x) I% y2 {* C, LEfficient ...

3 k6 ~" g7 t1 [4 A9 I" P' l现在级别太低评不了分,但回头一定补上
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