iPSC的一个基本问题？求解答！

gxbzjznn

最近在做成纤维细胞向干细胞的诱导重编程！诱导一定天数形成形态很像ES细胞的克隆，连续传代以后能继续稳定形成克隆（更多），但免疫染色结果只能染出Sox9，却染不出Sox2、Oct4、Sox17以及Foxa2,那么请问一下，我这个细胞目前处于一种什么样的状态？具有部分干性？要想得到真正的干细胞，接下来我该往哪个方向努力？求各位大神、前辈、同行指导！

yeshch

我自己也没有重编程过，只是看过实验室其他人做，最好上图片，表明是哪一代，那一天，什么细胞。人的和鼠的差别挺大的。至少OCT4，NANOG应该有的

genedu

首先检验一下抗体是否好用或者失效。其次建议诱导iPSC的时候用OG或者NG的成纤维细胞系，这样一开始就能挑取质量好的单克隆。另外，多挑取几个单克隆系，有的细胞系就是不好，别较真儿

gxbzjznn

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2 E4 P( S4 G- Z3 |9 N! ~, E" }
; h% n4 {: @8 s这个真的不太方便放上来 谢谢理解

gxbzjznn

回复 genedu 的帖子% e, m2 D4 z& r0 J: {1 b

& i. a  o8 \6 `谢谢你的建议

sunsong7

iXEN（胚外内胚层）

gxbzjznn

回复 sunsong7 的帖子7 |& Q/ n0 Y5 w. g' u4 i

8 s# a1 Z, s: T求进一步解释！谢谢！

sunsong7

extraembryonic endoderm cells （XEN）是细胞重编程过程必经的桥梁: c( S# T, h% p/ j3 P
Zhao, Yang, Zhao, et al. A XEN-like State Bridges Somatic Cells to Pluripotency during Chemical Reprogramming[J]. Cell, 2015, 163(7):1678–1691.
) R3 F5 T* z2 p8 R, o) RBeyret E, Belmonte J C. The XEN of reprogramming.[J]. Cell Research, 2016.
% f9 ?% H, D3 M  H

sunsong7

Séguin C A, Draper J S, Nagy A, et al. Establishment of Endoderm Progenitors by SOX Transcription Factor Expression in Human Embryonic Stem Cells[J]. Cell Stem Cell, 2008, 3(2):182-95.

gxbzjznn

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: A" j6 C1 N. E, w3 x/ {
5 _# @0 ^/ l* V/ }8 ^里面却有明确说明这个过程必须经历Sox9 positive and Sox2 、Oct4、Sox17、Foxa2 negative 过程吗？谢谢