iPSC的一个基本问题？求解答！

gxbzjznn

最近在做成纤维细胞向干细胞的诱导重编程！诱导一定天数形成形态很像ES细胞的克隆，连续传代以后能继续稳定形成克隆（更多），但免疫染色结果只能染出Sox9，却染不出Sox2、Oct4、Sox17以及Foxa2,那么请问一下，我这个细胞目前处于一种什么样的状态？具有部分干性？要想得到真正的干细胞，接下来我该往哪个方向努力？求各位大神、前辈、同行指导！

yeshch

我自己也没有重编程过，只是看过实验室其他人做，最好上图片，表明是哪一代，那一天，什么细胞。人的和鼠的差别挺大的。至少OCT4，NANOG应该有的

genedu

首先检验一下抗体是否好用或者失效。其次建议诱导iPSC的时候用OG或者NG的成纤维细胞系，这样一开始就能挑取质量好的单克隆。另外，多挑取几个单克隆系，有的细胞系就是不好，别较真儿

gxbzjznn

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1 t+ u/ p* L. y, q" i: O( i8 V
这个真的不太方便放上来 谢谢理解

gxbzjznn

回复 genedu 的帖子! s, j- J8 `# Y

) D$ i4 O) I, M9 l9 S' L谢谢你的建议

sunsong7

iXEN（胚外内胚层）

gxbzjznn

回复 sunsong7 的帖子5 z" W- n( t7 A
; Z* y- b3 @4 Y' J+ O5 n
求进一步解释！谢谢！

sunsong7

extraembryonic endoderm cells （XEN）是细胞重编程过程必经的桥梁
+ e; Y- H) I/ o. y/ y$ TZhao, Yang, Zhao, et al. A XEN-like State Bridges Somatic Cells to Pluripotency during Chemical Reprogramming[J]. Cell, 2015, 163(7):1678–1691.
1 I4 G; i5 }/ O3 x# bBeyret E, Belmonte J C. The XEN of reprogramming.[J]. Cell Research, 2016.( c: D6 ]3 I: o' t. Y

sunsong7

Séguin C A, Draper J S, Nagy A, et al. Establishment of Endoderm Progenitors by SOX Transcription Factor Expression in Human Embryonic Stem Cells[J]. Cell Stem Cell, 2008, 3(2):182-95.

gxbzjznn

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' Q6 S, P' c9 }2 Y1 a) \
' g" f- f* y; q8 c里面却有明确说明这个过程必须经历Sox9 positive and Sox2 、Oct4、Sox17、Foxa2 negative 过程吗？谢谢