免疫细胞分离的几种方法

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表面标记分子法
" X; C$ e- u7 s- a% F( C( |E-花环沉降法
, L+ p. O4 b1 A. Z1 z( Z% C4 B人类T细胞表面有SRBC受体绵羊红细胞受体，能够与多个SRBC结合，形状如花环；1 \; k1 _- p8 n, N( U5 O* ^
亲和淘洗法
' ^  Y! b/ H( l特异性单克隆抗体包被在聚苯乙烯培养皿/板表面，吸附具有相应表面分子的目标细胞，如抗Ig抗体吸附B细胞、抗CD3抗体吸附成熟T细胞，这些都属于正选分离
' B3 Y0 n( i7 t+ Y4 \5 T细胞毒法
8 c6 [0 |' V: w: Y6 n8 @: i0 v1 _2 }补体介导的特异性细胞毒分离法，在抗体的作用下裂解能与抗体结合的细胞，从而分离出不能与此抗体结合的细胞群，属于负选方法" a' k8 L6 R5 n5 ~; b# I
荧光激活细胞分离法& ?- j/ a7 I9 ^; c8 g  Q
最有效法，目标细胞经荧光素标记单抗结合后，在激发光照射下会产生荧光，由FASC分选功能分选出来
* S+ l" z1 G) ?. K免疫磁珠分离法2 _# ]: P) Z' f) V
在磁珠表面包被特异型抗体，与目标细胞表面的抗原结合而与特定细胞粘附，再用磁珠分离" h* E7 U, |& _7 a
4 Q/ B! u- ^0 n$ l0 w! M5 k
对低渗的敏感性3 f8 c. O: ?0 S; H  |3 {) E
红细胞对低渗的敏感性要高于白细胞，例如红细胞裂解液8 s! T, j3 e5 P4 N

5 b$ h  ~6 R& x相对密度差异
$ a! N/ i, I/ |7 O- G( q) Y聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法即FICOLL
4 s" I. F) Y, D. Q' ~红细胞和粒细胞相对密度大于ficoll，沉底；血浆密度最低位于最顶端；分层液位于中间，PBMC位于血浆和分层液的白膜层处* w7 c* e; J4 L. C: {& `
PERCOLL密度梯度离心法
& a% [6 n+ h: |0 \最上层是死细胞残片和血小板，然后是单核细胞层，然后是淋巴细胞层，最后是粒细胞和红细胞
: \! ~4 D: X& y& Q) R, V0 N* {+ ^2 W4 C+ f
黏附和吞噬能力, u; l! S2 c9 a; ^6 Y7 h7 o. O, `
单核和巨噬细胞具有较强的粘附能力，加入细微的羟基铁颗粒或乳胶颗粒，待单核和巨噬细胞充分吞噬后，用密度梯度离心或者磁场吸附去除，利用尼龙毛柱分离B细胞。
  L- O  |# f0 I( Z9 z, z: a1 X3 [2 p" @
特异性促生长因子
' @, @! D0 b7 {# s# K8 g- P利用不同种类的免疫细胞需要的生长因子不同进行促进生长