免疫细胞分离的几种方法

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表面标记分子法2 B; B, u* h( u# r$ }" [
E-花环沉降法* @( j  I# E3 @1 Y$ C
人类T细胞表面有SRBC受体绵羊红细胞受体，能够与多个SRBC结合，形状如花环；
( j- A8 S3 A2 `) W+ f1 g* C0 u5 V亲和淘洗法
" e6 a" W8 C: E/ W# X特异性单克隆抗体包被在聚苯乙烯培养皿/板表面，吸附具有相应表面分子的目标细胞，如抗Ig抗体吸附B细胞、抗CD3抗体吸附成熟T细胞，这些都属于正选分离
" {3 E. o1 O4 Q  `细胞毒法
9 y( {/ v, r7 |9 u) U  G& a补体介导的特异性细胞毒分离法，在抗体的作用下裂解能与抗体结合的细胞，从而分离出不能与此抗体结合的细胞群，属于负选方法
5 y9 Y2 N: c2 n; o3 u% X荧光激活细胞分离法) c: Z$ K8 R! F! z% x. h
最有效法，目标细胞经荧光素标记单抗结合后，在激发光照射下会产生荧光，由FASC分选功能分选出来
. N  ]/ J8 z/ A0 L) J! x免疫磁珠分离法! V" h% l# A$ F- b- Y0 L
在磁珠表面包被特异型抗体，与目标细胞表面的抗原结合而与特定细胞粘附，再用磁珠分离
9 c; c9 d+ q7 q7 \' t: A7 m
" V, X, n5 }- C对低渗的敏感性; _$ W9 E, x3 F6 `# d1 ~
红细胞对低渗的敏感性要高于白细胞，例如红细胞裂解液
9 a$ ^) [9 x; l. j8 U! o
* C& g* ?+ t, @9 I相对密度差异
3 E' Q  I, {, X: Q- K聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法即FICOLL
( q, |9 g, K/ J% d$ f红细胞和粒细胞相对密度大于ficoll，沉底；血浆密度最低位于最顶端；分层液位于中间，PBMC位于血浆和分层液的白膜层处
( v3 z- F3 u, @8 u$ S  O4 }PERCOLL密度梯度离心法
! v7 O4 B2 @0 j1 k' C最上层是死细胞残片和血小板，然后是单核细胞层，然后是淋巴细胞层，最后是粒细胞和红细胞  k- @- B9 a2 }+ Z
! @) Z4 _" R/ d$ T, n/ K9 Y; k
黏附和吞噬能力- g. d' y% z, e! D6 u2 w1 J+ z& W9 y
单核和巨噬细胞具有较强的粘附能力，加入细微的羟基铁颗粒或乳胶颗粒，待单核和巨噬细胞充分吞噬后，用密度梯度离心或者磁场吸附去除，利用尼龙毛柱分离B细胞。
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) T+ l! N; }. ?8 C+ z  H- X特异性促生长因子+ M+ |& ^* `. l% C
利用不同种类的免疫细胞需要的生长因子不同进行促进生长