NK细胞培养过程中，用血清代替血浆有关系吗？

爱学习的青年

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6 x  ^% m; A; K; A3 o就是因为有好几个地方感觉不如意的，所以想请教一下，不然无法排除，如果血清可以替代血浆，那应该就是冻存单核细胞的问题，感谢大家

免疫与细胞

回复 爱学习的青年 的帖子0 Q" `' R4 Y7 p

7 ^+ [0 d7 V/ W! O+ `9 H4 i; x* I9 U2 V看了你的回复，我感觉最大的问题是你提取完PBMC，直接就冻存了。你怎么保证冻存后细胞活性，又是怎么操作的。问题最大是在这里

浅浅的花花

是动物血清吗？一般动物血清是否要灭活要根据购买的血清说明书，很多是不需要灭活的。建议还是用自体血浆，分离获得PBMC之前，先高速离心获得自体血浆，将自体血浆56℃灭活30min，高速离心去掉凝集的纤维蛋白原等絮状沉淀，即可添加到NK细胞培养基中，增殖效果明显！

爱学习的青年

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3 \8 X  @: Q) P$ I6 [- `, |+ E
, g4 ~7 e7 \( S3 N( j那天老师给我们一个新方法提取单核细胞与常规方法提取单核细胞，最后对比两种方法提取的单核细胞纯度，最后血浆上清让我们扔掉了，后面没想到要用这批细胞培养NK

爱学习的青年

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比如在“今天”做单核细胞的提取，然后直接冻存了，3天后复苏这批细胞今天NK培养。没说清楚

gondobar

我们做的NK细胞培养，所用的原细胞为2-4天之前所提取的单核细胞？这句没懂，2-4天前的细胞还养？

免疫与细胞

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% F& A/ P7 g' ?2 o3 H1 @3 j血清处理的没问题，估计血清本身有问题。

免疫与细胞

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不用再抽血分离血浆啊，直接用提取单个细胞的血提血浆，先离心分离血浆，在用DPBS稀释血液，加到淋巴细胞分离液中分离单个核细胞

爱学习的青年

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" h; W8 [, W0 b# c+ M血清放56度灭活，看到一点点絮状物，最后看到的细胞特别少

爱学习的青年

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补充一下。血清是买来的;单核细胞是抽的其中一个人血液提取的;由于当时没有工具，所以就没有再次抽血分离血浆