NK细胞培养过程中，用血清代替血浆有关系吗？

爱学习的青年

我们做的NK细胞培养，所用的原细胞为2-4天之前所提取的单核细胞，无血浆，因此用血清按血浆灭活步骤进行处理，用血清代替血浆。3-4天乃至1周后后显微镜下整个视野里细胞数目极少，几乎为个位数，这些是什么原因呢？

免疫与细胞

你说的逻辑有点混乱啊。你的血清是从哪里来的？动物的？如果是动物的，就按照使用说明书使用就可以啊，没有问题，可以替换。. V. L& O/ M$ C
没有培养出来细胞可能你的血清有问题，也有可能操作不对。

爱学习的青年

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1 Q: U! b% ]1 {1 |
补充一下。血清是买来的;单核细胞是抽的其中一个人血液提取的;由于当时没有工具，所以就没有再次抽血分离血浆

爱学习的青年

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0 K' G  @" Q+ h3 o血清放56度灭活，看到一点点絮状物，最后看到的细胞特别少

免疫与细胞

4 Y, r+ p* A7 Z

, \' ]6 P7 n+ Z回复 爱学习的青年 的帖子8 g. H1 O+ B5 E: [  b1 p0 A
2 W, P5 d4 |. ~( d
不用再抽血分离血浆啊，直接用提取单个细胞的血提血浆，先离心分离血浆，在用DPBS稀释血液，加到淋巴细胞分离液中分离单个核细胞

免疫与细胞

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6 h2 r4 Y5 y0 q: a7 o# L! Q4 B# F  W# r
血清处理的没问题，估计血清本身有问题。

gondobar

我们做的NK细胞培养，所用的原细胞为2-4天之前所提取的单核细胞？这句没懂，2-4天前的细胞还养？

爱学习的青年

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# G' w1 s; d; L/ V  U比如在“今天”做单核细胞的提取，然后直接冻存了，3天后复苏这批细胞今天NK培养。没说清楚

爱学习的青年

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/ O8 j8 C5 \/ o; P( G
2 Z! l" {) n5 o1 {那天老师给我们一个新方法提取单核细胞与常规方法提取单核细胞，最后对比两种方法提取的单核细胞纯度，最后血浆上清让我们扔掉了，后面没想到要用这批细胞培养NK

浅浅的花花

是动物血清吗？一般动物血清是否要灭活要根据购买的血清说明书，很多是不需要灭活的。建议还是用自体血浆，分离获得PBMC之前，先高速离心获得自体血浆，将自体血浆56℃灭活30min，高速离心去掉凝集的纤维蛋白原等絮状沉淀，即可添加到NK细胞培养基中，增殖效果明显！