CIK培养时，国产细胞因子浓度要增加么？

lybai

目前我们做CIK培养时，用的国产细胞因子，干扰素为1000U/ml,   OKT3为50ng/ml.   IL-2为500U/ml, 效果不好，数量级达不到，请问国产因子浓度需要加大么？

lybai

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" Q3 J' ?$ r6 y4 v/ P$ H0 t$ c& Z& n! a& M( o
抽了20ml正常人的血，分离出PBMC，分完能看到明显红细胞。
+ G% k; |8 |* _' q9 U' l第0天：接种浓度1.1*10的6次方/ml, 用Gibco AIM-V培养基25ml，接种时加入了伽马干扰素，5 N) S6 F4 _; N+ x, X% }
第1天加入CD3，IL-2，浓度如第一个帖子，( W- |, |% p# W( z% y
第3天，培养基颜色变化不大，计数为3*10的6次方，补液25ml,添加IL-2; I% z; N& k8 v) n
第8天，培养基颜色变黄，计数3.7*10的6次方，补液50ml,添加IL-2.; ]( M& [& R- X  g' D# M* o) ]
第10天，颜色稍微变黄，计数6*10的6次方，补液100ml,添加IL-2
& x$ `* t; {1 |第13天，培养液颜色没什么变化，计数1.8*10的6次方，

lybai

第0天还加入了1%的自体灭火血浆，忘记说了

lybai

回复 阿秀哥 的帖子7 x  g  [$ c: M8 W

, i* r  H( i/ u谢谢您提供经验。

lybai

回复 wzs1985 的帖子
2 a, Q% a$ \) D' E, l9 h! B0 e7 _3 I0 ]# ?
这个ED50需要自己测吗？没看到购买的CD3单抗上有标注ED50，其它因子直接标注了活性如10*7IU/mg,培养时，我看只有CD3单抗用的单位是ng/ml,其它都是活性单位IU/ml,这个已经是活性单位了，还要换算么？
& P$ S, L! Q* d- I

lybai

回复 Ivan0108 的帖子& z3 a. `' F" X  x8 a
& O2 e8 t4 @5 ^( ~2 v. ?2 _# G, C
接种密度需要控制在多少比较合适？还有一个不太明白，伽马干扰素和IL-2加入时都是按照活性单位来计算加入量，为什么CD3单抗却是按浓度单位ng/ml算加入量。

lybai

回复 baoweih 的帖子3 b/ K, h1 W- U3 \7 I

( E. g: Z/ M- k; j( q是的，终浓度是50ng/ml

lybai

回复 baoweih 的帖子0 L+ B! M1 t6 r# v) V  _; Y

1 X6 \5 ], b  `% ^' @8 i: S& s" G包被一般就不用加游离的了，