CIK培养时，国产细胞因子浓度要增加么？

lybai

目前我们做CIK培养时，用的国产细胞因子，干扰素为1000U/ml,   OKT3为50ng/ml.   IL-2为500U/ml, 效果不好，数量级达不到，请问国产因子浓度需要加大么？

lybai

回复 lyj-0017 的帖子& H+ J* q' H0 N& ~% R- U
# b0 R* F* J$ H1 R
抽了20ml正常人的血，分离出PBMC，分完能看到明显红细胞。
0 m! b! j8 M$ M# ^. f4 }' i第0天：接种浓度1.1*10的6次方/ml, 用Gibco AIM-V培养基25ml，接种时加入了伽马干扰素，
" j& J& Z3 p. |9 C; T2 o8 h第1天加入CD3，IL-2，浓度如第一个帖子，6 Q# Z# T$ Z; z/ R* k/ U. p
第3天，培养基颜色变化不大，计数为3*10的6次方，补液25ml,添加IL-2$ ~3 i: z8 b4 {  r: ]' S! N8 X
第8天，培养基颜色变黄，计数3.7*10的6次方，补液50ml,添加IL-2.
( V9 G6 ^  T& j7 E9 O. A4 ^第10天，颜色稍微变黄，计数6*10的6次方，补液100ml,添加IL-27 Y% _' T6 u' M$ q% m. M
第13天，培养液颜色没什么变化，计数1.8*10的6次方，

lybai

第0天还加入了1%的自体灭火血浆，忘记说了

lybai

回复 阿秀哥 的帖子( |- y* @' F# P2 I( c3 G
) A2 g# @9 ]+ g/ Z& u4 j
谢谢您提供经验。

lybai

回复 wzs1985 的帖子- }: Q: N. v/ @% S! W( ^

# X% t2 p* W) r+ [% `' ?这个ED50需要自己测吗？没看到购买的CD3单抗上有标注ED50，其它因子直接标注了活性如10*7IU/mg,培养时，我看只有CD3单抗用的单位是ng/ml,其它都是活性单位IU/ml,这个已经是活性单位了，还要换算么？
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lybai

回复 Ivan0108 的帖子8 j$ F% _  F( k: W
, H3 `; ~% Z6 C" N* ]+ A  v* f4 t
接种密度需要控制在多少比较合适？还有一个不太明白，伽马干扰素和IL-2加入时都是按照活性单位来计算加入量，为什么CD3单抗却是按浓度单位ng/ml算加入量。

lybai

回复 baoweih 的帖子' @; g( E- X  b' [* J6 B- F
/ S) G& e/ ^. @  P
是的，终浓度是50ng/ml

lybai

回复 baoweih 的帖子
8 [1 l% @  @5 v. N) h3 Z9 L" l
. k& e' {5 y; m. }5 ]2 F包被一般就不用加游离的了，