干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 29660|回复: 1
go

成体NSCs原代消化酶的问题 [复制链接]

Rank: 1

积分
35 
威望
35  
包包
354  
楼主
发表于 2017-5-12 17:25 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
本帖最后由 cloud100 于 2017-5-12 17:25 编辑 0 u' {: I! d0 ~: o

  d2 S7 {9 i/ j, y+ Z3 n  `, s8 P* t7 R+ g
我现在养成体NSCs,如图所示,取3月龄大鼠的SVZ和DG取脑组织(可能范围略宽一点),剪碎成约1mm3大小组织块,
! d1 d! x0 Q1 D用3ml Hank’s液+2.5mg/ml胰酶(gibico)+15mg/ml 木瓜酶(solabio)+2.5mg/ml 2型胶原酶(merk)+0.2mg/ml Dnase(solabio)+0.02%EDTA,
7 ~& X$ e5 s5 b3 ?37℃消化 30min,发现组织块消化效果很差,基本上看不出组织块有减少的迹象,经过吹打后,依然有大量组织块,消化得到的细胞也很少。
( {& \- w; ?/ h/ d; _: c7 \( `# R( t3 [; O* d
我这个酶浓度是反复试验、不断加量到这个剂量的,已经比文献超出了许多倍,但每次都无法取得良好的消化效果。4 _- e& Y" v3 H( x2 n" N) S
以前养神经元,取新生鼠皮层,1.25mg/ml的胰酶,15分钟,组织块很快就彻底消化干净了,怎么成年鼠的脑组织这么难消化?
. Z. V4 X. u; Z# F" M  a: R
1 ^$ r, E7 X9 G  F: r$ W请教各位老师,有没有养成体NSCs的经验可以指教的?谢谢。' W5 }4 m9 D, ~$ R( c- Z3 H
2 m: J% `7 l* i: N+ u7 D
附件: 你需要登录才可以下载或查看附件。没有帐号?注册
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 1

积分
35 
威望
35  
包包
354  
沙发
发表于 2017-5-13 08:03 |只看该作者
消化酶都是现配现用,质量应该不存在问题,胰酶每次拿来传代效果都很好。。胶原酶和木瓜酶都是新买的。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题 ›
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-10-11 01:42

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.