成体NSCs原代消化酶的问题

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: s" [/ v( A, X我现在养成体NSCs，如图所示，取3月龄大鼠的SVZ和DG取脑组织（可能范围略宽一点），剪碎成约1mm3大小组织块，6 B0 S6 ?% l4 m  h3 v
用3ml Hank’s液+2.5mg/ml胰酶（gibico）+15mg/ml 木瓜酶（solabio）+2.5mg/ml 2型胶原酶（merk）+0.2mg/ml Dnase（solabio）+0.02%EDTA，
# U: `2 K' i+ Y' q37℃消化 30min，发现组织块消化效果很差，基本上看不出组织块有减少的迹象，经过吹打后，依然有大量组织块，消化得到的细胞也很少。; X* p3 x2 Z) r3 L+ h$ S" \

3 B' {& A' {; i+ q# ], d, V; b$ l我这个酶浓度是反复试验、不断加量到这个剂量的，已经比文献超出了许多倍，但每次都无法取得良好的消化效果。
8 J2 c. A6 V) R! d! R+ q6 |; {3 ]以前养神经元，取新生鼠皮层，1.25mg/ml的胰酶，15分钟，组织块很快就彻底消化干净了，怎么成年鼠的脑组织这么难消化？5 v# n, o5 T( t* h) l( K2 g( A# ], y
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请教各位老师，有没有养成体NSCs的经验可以指教的？谢谢。5 u( F  h+ n0 ?
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消化酶都是现配现用，质量应该不存在问题，胰酶每次拿来传代效果都很好。。胶原酶和木瓜酶都是新买的。