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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑 + ^* t; o) v6 N
8 n; U% E# a! F接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:
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/ f, @, U. j1 r应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。" y9 Q5 h. z6 E, b+ R. {# V; C4 Y5 D/ O
: Y: v. n& b8 m7 o* ^收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵 l9 T8 Z5 N/ a- c' y% ]: t
过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。8 K$ ~( F2 T$ {. \4 p; M
如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。 |
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