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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑 Z0 W1 ~: Z8 X/ k
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接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:$ o1 x! d9 }! J4 i; c
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4 Q; @6 d8 F( v9 X2 Q2 L* K3 P2 x; K) P1 K2 O7 A$ I" k
应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。7 j1 Z! E: E: j1 M P
" `3 ]% ?7 ~! Q. N) @1 |6 p8 C; X收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵- m, g7 l3 ]) I# v
过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。
# C! c: D: y h2 K' J) Y8 Y如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。 |
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