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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑
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& ?1 u+ C- \: l接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:
7 f0 }! p0 j: s$ ?* I* ~. B7 i w- @4 }! x2 G/ q8 \1 P0 Q7 J& V' X
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E1 B5 ?; D, i0 t应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。3 M6 r) {7 U$ K) C, Q) F0 h
8 f3 z D0 j. j7 `: t收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵
" j+ M: F. V3 c# s3 l! E; q% p6 J过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。
d5 N) F, |5 J$ h8 E如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。 |
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