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讨论去除PBMC中少量红细胞方法     [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-7-7 09:49 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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近期,提取的PBMC中含有少量红细胞,请问大家有什么好的方法去除红细胞,不影响白细胞活性和后续培养的。有好的红细胞裂解液也可以推荐。
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沙发
发表于 2017-7-7 10:31 |只看该作者
吸取白膜层的时候尽量慢慢吸取,不要吸到红细胞
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藤椅
发表于 2017-7-7 11:17 |只看该作者
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* T/ U% h4 P" c; d  R
' j1 ~7 L( z* C& p5 Y% f2 F用裂解液后期长不起来的,用分离液再离一次试试,或者后期长起来后用注射用水裂解试试
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板凳
发表于 2017-7-7 11:38 |只看该作者
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8 L6 T* R  `" h$ k( n! l0 I
: Y4 k7 X, x( f' q0 O试一试高渗与低渗的PBS,先用1.8x的PBS处理几分钟,再用等体积的2.2x的PBS中和,然后离心。处理时间以及回收率就需要用你的经验把握了。
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报纸
发表于 2017-7-7 13:26 |只看该作者
先hes沉降后ficoll分离
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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2017-7-7 14:06 |只看该作者
1.上ficoll是用盐水充分稀释( l+ S' w3 m- p2 B2 `/ z$ [
2.离心降速时减少震动。
% b$ }' P1 p3 p4 ^$ r5 e3.吸白膜层时要轻柔。
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7楼
发表于 2017-7-7 14:10 |只看该作者
再上一次ficoll即可
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8楼
发表于 2017-7-7 14:28 |只看该作者
如果不是使用适合的分离液,并掌握好恰当的离心力和离心时间等,基本上都会有一点红细胞。要完全去除基本上只有用裂解的方法,裂解液或低渗的方法
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9楼
发表于 2017-7-7 16:25 |只看该作者
回复 王宏伟8901 的帖子6 s/ _6 `: J9 H$ A5 s

# ^0 }) M6 ?9 g* y& a, V  D7 w红细胞跟白细胞混一起了
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10楼
发表于 2017-7-7 16:26 |只看该作者
回复 翎宝 的帖子
! ]; R) D$ s* j3 o: A, e
0 i) ?) u; d4 R) S0 i7 p所以问是否有好的红细胞裂解液
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