讨论去除PBMC中少量红细胞方法

只因偶然

近期，提取的PBMC中含有少量红细胞，请问大家有什么好的方法去除红细胞，不影响白细胞活性和后续培养的。有好的红细胞裂解液也可以推荐。

王宏伟8901

吸取白膜层的时候尽量慢慢吸取，不要吸到红细胞

翎宝

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用裂解液后期长不起来的，用分离液再离一次试试，或者后期长起来后用注射用水裂解试试

wzs1985

回复 只因偶然 的帖子9 q% ~: w8 ]& ~3 I; o$ @

& N4 S+ G$ Z* |- S' w( B试一试高渗与低渗的PBS，先用1.8x的PBS处理几分钟，再用等体积的2.2x的PBS中和，然后离心。处理时间以及回收率就需要用你的经验把握了。

rzghc

先hes沉降后ficoll分离

拉二胡的拉尔夫

1.上ficoll是用盐水充分稀释3 n0 s4 g7 V1 ?" c: W3 M
2.离心降速时减少震动。
( Y6 q8 y% \# W; ?4 b9 M; R( `& x3.吸白膜层时要轻柔。

剡溪兰客

再上一次ficoll即可

金鹏

如果不是使用适合的分离液，并掌握好恰当的离心力和离心时间等，基本上都会有一点红细胞。要完全去除基本上只有用裂解的方法，裂解液或低渗的方法

只因偶然

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7 [7 `1 G) D" Q" ^3 J7 K  H' P" j2 V
红细胞跟白细胞混一起了

只因偶然

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  y. |4 m% D# K3 S5 [# f; @8 z
所以问是否有好的红细胞裂解液