请问Hela细胞该如何养呢

笨鑫

hela细胞该如何养呢？动物细胞和昆虫细胞培养时有那些不同呢？
: ~% V, O" g+ F! _$ `% l% Y       我刚开始培养细胞。1 o" e4 L  j: [* N
       谢谢大家！

小鲁鲁

HELA细胞虽然用的多，倒不是很好养，主要是贴壁不紧，换液的时候容易脱落。0 P, r- X% H, m' Z  X7 P# P
昆虫的细胞系，我只养过一种，是半悬浮的，很雷人也很累人……0 a* L$ l0 }4 T
至于区别，要看是什么动物的了，培养条件上会有一些差异，不过摸清楚了细胞的特性，不会很难养的。细胞系比干细胞好养多了。慢慢来，加油学习就行了！

shihuijunm

hela细胞的培养条件为:) U# @# j' Q" e" z/ T  w* d
高糖DMEM培养基,100ml/l胎牛血清;（培养液DMEM培养基，含10% FCS，100U /ml青霉素及100μg/ml链霉素，于37℃，5%CO2孵箱内培养）下生长就很好,详细可以参照司徒镇强主编的《细胞培养》。% ?$ G5 q# C; K5 ]0 j+ p, Q
传代步骤: 1．倒去细胞培养液(对于小口的培养瓶可采用顷倒方法,对于培养皿,必须用吸管吸出)
" f" S1 ~5 R  X& ^2．吸取适量的PBS加入培养瓶中,轻轻振荡后弃去重复一次,以清于血清成分,& Z" e9 v7 F5 {( G/ z
利于胰酶消化
7 h8 W" G3 n6 X) ?, q3．加入适量0.25%胰蛋白酶（一般100mm培养皿可加入1ml，15cm培养瓶加入5-8滴）转动培养瓶，使其湿润整个细胞房，高温下消化2-3分钟。% ?1 n6 [+ i0 x1 h' H
翻转培养瓶，肉眼观察细胞单层，见细胞单层薄膜出现针孔大小空隙时即可顷去消化液，如消化程度不够可延长消化时间，或置于37°C孵箱中加速胰酶作用如见大量细胞片装脱落，已消化过头，则不能顷倒消化液而直接进行下一步操作
! W" l; ^) _) X  R; f7 O4．加入适量培养液终止消化
* |3 l- H, a- x0 N+ x3 }( s1 n吸取瓶中培养液反复冲瓶壁上的细胞层，至全部冲下轻轻吹打，混匀，成细胞悬液取样计数，调整细胞浓度为5′10 /ml & c; ?6 D8 x2 y' M0 o7 W# F
15cm培养瓶培养时，吸取1ml细胞悬液加到新培养瓶中，加入4ml培养液，盖好,置37°C孵箱中培养。
+ z4 L$ M' T/ _1 x5 Y4 j/ P7 C传代的天数要以HELA细胞的生长密度为基础,细胞密度大了就要传,应该每天观察HELA细胞,注意其生长状态.HELA细胞的生长分5期:. ]& f9 b, H$ s0 X; ]) K; d
游离期
  i4 t* n- O% v  ~细胞经消化分散后，由于愿生质收缩及细胞弹性，细胞成圆形，折光性强，呈悬浮状态。
* X# A- y. X5 t# S! u; e, S- F吸附期
. y1 u( t  ?) D, N( B2 b# s6 C5 D接种24小时后，由于细胞的附壁特性，开始贴壁，圆形细胞变成延展状态。8 k5 |" a5 r+ W& }3 x# _* P1 X
繁殖期
9 b+ a0 O% ?7 m, q1 n细胞快速生长、分裂，形成细胞岛直至细胞单层。  t; z$ `1 m7 F/ _* s6 }+ |
维持期; j2 ]% ]$ t- @" a
细胞形成单层后生长与分裂减缓、折光性减弱，细胞内颗粒增多，由于代谢物的积累，CO2增多，培养液变黄。
7 z" @0 E; C4 |/ I7 t" N# N6 }' i衰退期
. O( }* d3 S: l! J如不及时换液和传代，由于营养缺乏、代谢物积累，细胞内颗粒进一步增多,立体感差，细胞皱缩、脱落、逐渐衰老死亡。
9 i; D- P3 m. Y# p应该在其维持期和衰退期及时换液.一般而言是4天换一次液.

crystal

写得很好，我也正好要开始养了，帮助很大哟！