请问Hela细胞该如何养呢

笨鑫

hela细胞该如何养呢？动物细胞和昆虫细胞培养时有那些不同呢？7 c# P; _0 m  Y( [
       我刚开始培养细胞。' Z2 B3 \+ W" X( K
       谢谢大家！

小鲁鲁

HELA细胞虽然用的多，倒不是很好养，主要是贴壁不紧，换液的时候容易脱落。4 N4 G& e4 _% i. d7 j5 V9 x
昆虫的细胞系，我只养过一种，是半悬浮的，很雷人也很累人……! c( V6 K, F' Y: O9 a6 e" [
至于区别，要看是什么动物的了，培养条件上会有一些差异，不过摸清楚了细胞的特性，不会很难养的。细胞系比干细胞好养多了。慢慢来，加油学习就行了！

shihuijunm

hela细胞的培养条件为:
* S8 r. E4 A* x( L* x高糖DMEM培养基,100ml/l胎牛血清;（培养液DMEM培养基，含10% FCS，100U /ml青霉素及100μg/ml链霉素，于37℃，5%CO2孵箱内培养）下生长就很好,详细可以参照司徒镇强主编的《细胞培养》。
7 _& h9 U, }/ m# b5 g/ R传代步骤: 1．倒去细胞培养液(对于小口的培养瓶可采用顷倒方法,对于培养皿,必须用吸管吸出)
# o; i- u$ o% \# a" n2．吸取适量的PBS加入培养瓶中,轻轻振荡后弃去重复一次,以清于血清成分,
, f$ S9 g2 |1 j0 R. |8 G利于胰酶消化( a* N( _$ o: F2 P/ l5 G7 ~
3．加入适量0.25%胰蛋白酶（一般100mm培养皿可加入1ml，15cm培养瓶加入5-8滴）转动培养瓶，使其湿润整个细胞房，高温下消化2-3分钟。
9 D, s/ h0 H' b9 {翻转培养瓶，肉眼观察细胞单层，见细胞单层薄膜出现针孔大小空隙时即可顷去消化液，如消化程度不够可延长消化时间，或置于37°C孵箱中加速胰酶作用如见大量细胞片装脱落，已消化过头，则不能顷倒消化液而直接进行下一步操作$ |; X! R* G. E: Y' N, M
4．加入适量培养液终止消化
4 Q- e9 z. U$ d吸取瓶中培养液反复冲瓶壁上的细胞层，至全部冲下轻轻吹打，混匀，成细胞悬液取样计数，调整细胞浓度为5′10 /ml . M" N5 q  S+ A; L2 G$ X  \- v+ k6 N
15cm培养瓶培养时，吸取1ml细胞悬液加到新培养瓶中，加入4ml培养液，盖好,置37°C孵箱中培养。9 Y' O1 I: d$ ^9 A( @1 p
传代的天数要以HELA细胞的生长密度为基础,细胞密度大了就要传,应该每天观察HELA细胞,注意其生长状态.HELA细胞的生长分5期:4 v/ B' E0 d+ l+ D
游离期
; \5 H, K9 W, w! m! I细胞经消化分散后，由于愿生质收缩及细胞弹性，细胞成圆形，折光性强，呈悬浮状态。) b; X7 b- o( X2 y% G: _
吸附期
+ h# D' {# i; @/ p: z接种24小时后，由于细胞的附壁特性，开始贴壁，圆形细胞变成延展状态。- u/ o7 q& {8 ?" j! b
繁殖期% j- i$ M8 {+ K& v4 \- \4 ]# D1 {' @
细胞快速生长、分裂，形成细胞岛直至细胞单层。# B7 o* l4 j4 v: @. a# N0 ?0 B6 k; I
维持期
3 K0 y# N3 a; H, m% c. ~细胞形成单层后生长与分裂减缓、折光性减弱，细胞内颗粒增多，由于代谢物的积累，CO2增多，培养液变黄。+ Y, W5 ?- D! [3 t5 [5 k4 C- p! |
衰退期
5 G; Y( q5 r. _如不及时换液和传代，由于营养缺乏、代谢物积累，细胞内颗粒进一步增多,立体感差，细胞皱缩、脱落、逐渐衰老死亡。. B8 z3 R, ]; s  u3 ~- F
应该在其维持期和衰退期及时换液.一般而言是4天换一次液.

crystal

写得很好，我也正好要开始养了，帮助很大哟！