一次失败的脐带组织贴壁法尝试

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本人近日进行了一次脐带组织贴壁法之后，发现除了受污染外，培养箱都有一种腐烂的臭味，请问大家哪位有人经历过这样的事情，该如何解决？感谢！

待鹤

是培养箱太长时间没有消毒灭菌而长菌了吧。培养箱最好一两周做一次消毒灭菌，每天也要注意观察底盘的水附近是否长有霉菌。

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我想应该是脐带组织在37度腐烂了吧，我很想知道有尝试过这只哦那个分离方法的高人进行解析一下！

hawkyiger

腐烂？就算腐烂也是由于微生物污染造成的啊。。。首先注意无菌操作，在剪碎铁壁之前用含双抗的纯水多洗几遍；组织块尽量剪得小一点，铺的密度稀一点，贴完之后可以过一周再动它。有的时候感觉没有希望的贴壁组织块可能一段时间后就分离出一大片细胞。

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回复 4# hawkyiger : R; ?0 w. s) b. P+ i" m

- A. a% m# o8 U( l1 P( J
1 V3 m; A* U0 i( Q' Y- G    嗷，明白了，谢谢大家，我们这个论坛的人好热情啊，不过我还想问问楼上是否有什么其他关于组织贴壁法的东西可以补充一下，感觉比较专业啊！

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怎么没有人来赐教？？呜呜

wshzhoum

回复 4# hawkyiger
0 b; {! X3 H0 {% S% d) Q6 }6 L4 S" T) E! I" p$ k8 @

! E1 Z* f2 Y- s) ^4 r7 U; d    想请教一下~脐带组织块贴壁法操作时，经常会有很多胶质，影响贴壁和贴壁密度~这个怎么处理呢？

hawkyiger

回复 5# 5784630
! A; t/ V3 Z  H6 E; l: r6 g
# W5 |2 O8 l7 W0 P  r其它的也没什么了，只是贴壁的时候要尽量剪得细一点，铺完后先不要着急加培养基，否则一加就会冲起来了，而且加的时候要尽量小心，控制一下加的力度。程序上就那样，但很多时候还是跟脐带有一定关系的，并不是每根都能得到好的结果

hawkyiger

回复 7# wshzhoum 0 X* K  a$ X4 k, n" W
  J  T  ~) W8 k* J. x. B
这就属于脐带状态的问题了，因为你说的那种情况在制备脐带的时候就能看出来，会发现脐带一段一段呈油乎乎的状态，在前期把那些部分舍弃就可以。如果整根脐带都这样，那就可以不做嘛。

wshzhoum

回复 9# hawkyiger & n/ T" ^. h( K5 d# k" T9 Q
2 L1 L! N- g3 A. d' M, m4 \( O* U

* t$ c2 U) u: D* b9 O' M# R    咱脐带提取干细胞是从walton胶中提取，脐带表面倒没有特别油,但刨开后胶体就比较多了...本身胶体不就是应该黏糊糊的么?请问您是怎么铺瓶的或者对组织块有什么特殊的处理?我铺瓶时由于有胶体,不但贴壁很困难,而且组织块都挤在一起,无法均匀平铺.