关于滋养层细胞（3T3）

zjkenan

我用的3T3细胞做滋养层细胞
. d( u/ X& H3 M7 `; @8 D( J现在有一点不明白
% p7 i2 F9 F" M' j6 v有人说要用丝裂霉素C处理3T3细胞/ I* k& j5 G$ n( o) w
然后再接种到有明胶的培养瓶  B4 e" B+ }& `* G) k7 k
有人说是接种到有明胶的培养瓶
8 C1 Y$ U, C; r再用丝裂霉素C处理+ E" }5 a: @# P
哪种比较好呢

welldoneding

一般是用丝裂霉素C处理过然后再种到有明胶铺的培养皿比较好，我们实验室是这样做的，那样如果觉得3T3比较稀的话，还可以再加3T3细胞，不过两者都可以，看你习惯吧！

wyannb

当然是先用丝链霉素c先处理然后再接种到饲养层上了，你说的那种先接种到有明胶的培养瓶) T! N1 U* ~: O
再用丝裂霉素C处理只是将处理前的3T3放到明胶处理的培养瓶上而已，为了3t3更好的贴壁罢了。最后还是要接种到明胶处理培养瓶中的。

wyannb

哦，刚才第一句说错了，是处理后接种到培养瓶中

zjkenan

那我还有个问题啊
  q  I1 u- g! Q" o4 s就是为什么我用丝裂霉素C处理的细胞
) \) c! x9 M0 f0 ~放在油明胶的培养瓶里就不贴壁呢6 D+ w" ]8 m' T5 x- P; @8 T
我用的10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h

wyannb

我用的就是10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h没有问题。能够很好的贴壁

zjkenan

难道是我的明胶有问题么% i) e& z2 p4 h6 {) k
我的明胶是0.1%高温消毒的1 ]% v' S* z0 y  E, G
存在4°, ?9 c" D" \3 r: ]; `
那你明胶怎么用的呢

wyannb

明胶的浓度就是你用的0.1%的，我先是高压灭菌，然后滤一下放到四度保存

hansey

回复 5# zjkenan 1 B6 y1 A  p: `+ u" [! f" C
5 D0 P5 P4 W0 w9 r: \

6 E# m$ c3 u0 S5 |) q/ R消化过了？

powerwang521

请问LZ用3T3做滋养层养的是ips吗？