关于滋养层细胞（3T3）

zjkenan

我用的3T3细胞做滋养层细胞( c$ {; x6 z5 M1 r2 U- \" M
现在有一点不明白
( a# F1 U6 `4 r有人说要用丝裂霉素C处理3T3细胞. q# j, c; A  b3 [" Q4 r
然后再接种到有明胶的培养瓶
8 B2 a, r7 |% c# s2 {5 g有人说是接种到有明胶的培养瓶2 n' n* }# Y2 c  {
再用丝裂霉素C处理
) {9 o7 b: k! w: |7 c% e哪种比较好呢

welldoneding

一般是用丝裂霉素C处理过然后再种到有明胶铺的培养皿比较好，我们实验室是这样做的，那样如果觉得3T3比较稀的话，还可以再加3T3细胞，不过两者都可以，看你习惯吧！

wyannb

当然是先用丝链霉素c先处理然后再接种到饲养层上了，你说的那种先接种到有明胶的培养瓶
2 K) a2 O- H' |7 R再用丝裂霉素C处理只是将处理前的3T3放到明胶处理的培养瓶上而已，为了3t3更好的贴壁罢了。最后还是要接种到明胶处理培养瓶中的。

wyannb

哦，刚才第一句说错了，是处理后接种到培养瓶中

zjkenan

那我还有个问题啊0 g7 J9 j( t: b# \. [
就是为什么我用丝裂霉素C处理的细胞- c( e/ i' E; }. h6 J- l
放在油明胶的培养瓶里就不贴壁呢
; n* Y+ A! ^) E( Y我用的10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h

wyannb

我用的就是10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h没有问题。能够很好的贴壁

zjkenan

难道是我的明胶有问题么
) g% O% `% |/ p$ ]我的明胶是0.1%高温消毒的$ Z2 g  W9 v5 b( O% B  O
存在4°
" e( Q" w4 S  X6 u" x那你明胶怎么用的呢

wyannb

明胶的浓度就是你用的0.1%的，我先是高压灭菌，然后滤一下放到四度保存

hansey

回复 5# zjkenan
1 T& E  \8 @4 p2 J; Q6 O9 W) Q& D, _8 d2 ?# d7 e  U
* l# Q, Q( \* v& R
消化过了？

powerwang521

请问LZ用3T3做滋养层养的是ips吗？