间充质干细胞的冻存配方

beidouhan

请教一下，大家培养间充质干细胞的冻存都是什么的，我用的是90%血清和10%的DMSO,效果不是很好，想换，给些指导意见吧

beidouhan

大家快来帮帮我吧

study

我没有做过，不过看到过有用含10%DMSO、10%胎牛血清的DMED/F12培养基的冻存液的，可以试试看。

beidouhan

谢谢，是一个方案，还有别人知道的吗

nhzxcsc

血清浓度太高了，血清的营养是不全面的，这样冻存肯定是不行的。
" X. z1 L, e5 F( A( h4 u. |合适的应该是10%DMSD+平时饲养浓度2倍的FBS+平时使用的培养液

beidouhan

恩，值得考虑，大家冻存的时候细胞密度是多少，我们是1ml，3*106

dlzhang

细胞冻存液的配置有培养液：血清：DMSO=6;3:1,不知这种配置是否适于骨髓间充质干细胞？对于骨髓间充质干细胞也有人用培养液：血清：DMSO=4;5:1,或者血清：DMSO=9：1---------------------------------以上是我在网上查的，马上要开始做间充质干细胞了，强力顶起

beidouhan

谢谢了，有细胞密度的差别吗

dahui

这个应该问牛人，

xbs530515

除了冻存液，也要考虑一下冻存的步骤，如降温的程序。一般是4度30min，-20度30min，-80度过夜，然后放液氮。我冻存细胞用的是90%FBS+10%DMSO，感觉比10%DMSO+90%完全培养基要好，可以试试10%DMSO+20%FBS+70%培养基。你可以用一次来比较一下几种冻存液的性能。