有关猪的IPS问题

chenxin

有没有人关注猪的腺病毒或载体进行ips的问题，希望找到志同道合的人，讨论一下实验中遇到的问题

ambassador

看到猪，感兴趣进来的~我们还没做iPS，你可以讲讲你们是怎么做的？/ m+ _) S& v+ L+ t

' \* C3 N" _. j- ]2 J- X- Y  n/ [你们做iPS的目的是什么呢？作育种吗？

stonelee2050

我打算9月份开始做呢，正在查文献学技术了。关注关注！

大猪小猪落玉盘

目前国内做猪的IPS细胞系的主要有广州医药与健康研究院和上海肖磊那里，还有深圳华大基因、北京畜牧研究所、南开大学、中国科技大学等等，可以多联系交流，共同提高！！

cicadacjk

建议你不要选这个题
  E( g5 w" v. m) t+ r目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也好，都没有见到外源不沉默的）。) n- z8 `( G# N2 ^! A# C
就算你铁了心要试，也不建议你做腺病毒，小鼠腺病毒文章仅有一篇。从感染效率讲是不低，但重复性是很差的，应当是因为病毒感染导致细胞内部产生不利于重编程的变化。

上海过客

建议你不要选这个题
* F, _4 ?1 g+ ?2 t6 h! U; v8 F; @* X目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也 ...
. \% w, D# b& q2 H/ Kcicadacjk 发表于 2010-7-3 14:50

  s* ~' I6 m# k8 i/ T5 |) s) d" I, @& K4 q3 _# I
你这么一讲 ，我到觉得  “猪的 iPS 为什么做不出来” ，倒是一个很好的课题啊 。
7 C0 d& L9 F9 |
, h1 ~8 u7 C# [8 f& \- a人的 都可以了 ，猴子的也可以了 。但是猪的得不到 。  细微的 问题是什么呢 ？7 G* ~0 N7 L2 @' y7 u
( `- f6 S& \' r2 K. v
1 信号通路的问题吗 ？
( {  f: Z% {0 L 2  培养基 : O! y; }+ ^' t' t0 ~2 a: k
3  转基因 的 基因问题  ，不被甲基化识别 ？

cicadacjk

个人观点/ [7 X3 U* E" T' G  ~4 ]# D

+ ?9 i" T) e# j9 i培养条件尚且无法支持猪的胚胎干细胞状态0 K) X) A" O/ \9 C
8 T3 ?& H- _, p9 Z( J- {& J
例子：大鼠的ES做了20年- A* g# w9 [/ l/ p* Z7 c7 Z9 ~' ~
人的ES状态还没被广泛认可

上海过客

最近有类似 小鼠ES细胞培养形态的Human  ES  细胞培养文章 。可以借鉴一下吧 ？
2 ~  s9 E" l" b2 \" N+ q6 _5 ^6 K
, ?8 d0 t: `( Y' c7 j0 M$ ^9 w9 R  R
不知道 猴子的 ＥＳ　细胞　能不能得到嵌合体　？　　

qizhi502

回复 5# cicadacjk 5 d. n- u) V0 [' ?2 }
+ u2 y4 L$ [1 {# J- ]3 [8 R1 i: J
5 y8 F- N2 Z& L9 D2 U
   1 逆转录病毒在多能性细胞中会沉默，人的和小鼠的都可以，而猪为什么不沉默呢？这个问题确实比较困惑人，如果条件诱导（cre-loxp），是不是外源沉默细胞就传不下去了？/ v$ v( |: m$ ?- z
   2 猪的不出来是因为还没有真正ES 出来，连个对照都没有。不过最近出来类小鼠的HES 方法确实值得借鉴

cicadacjk

对于8楼9楼的问题
$ s5 S5 `; h) N5 }1 _& J我的观点是1 \. t8 G$ X% v0 T; X3 P3 V7 E% p
1. 类小鼠的HES是依靠过表达5个因子维持的，但我们不知道其天然状态到底是跟小鼠一样，还是一种区别于当前mES和hES之外的一种状态。
- v- ~5 D9 E& ?8 ]+ p4 X6 C2. 在猪里面尝试得到这种细胞也很有趣，内源是全部开放的，只是在这个基础上组成型表达几个因子。目前尚无类似报道。3 _, W9 F, P# Y9 ~
3. 猴的胚胎操作还比较困难，但我自己推测现在的猴iPS是无法做出嵌合猴的。0 A, F6 P" F- K4 C  L: v$ q
4. 逆转录病毒沉默是重编程最后期的事件之一，这只能证明所有尝试都还没有进入最后一个阶段。