有关猪的IPS问题

chenxin

有没有人关注猪的腺病毒或载体进行ips的问题，希望找到志同道合的人，讨论一下实验中遇到的问题

ambassador

看到猪，感兴趣进来的~我们还没做iPS，你可以讲讲你们是怎么做的？6 H! ?5 u+ a. b) _! _0 T( R5 ~( Z

2 T5 |% L; k) o5 [* c0 h9 r3 m+ Q你们做iPS的目的是什么呢？作育种吗？

stonelee2050

我打算9月份开始做呢，正在查文献学技术了。关注关注！

大猪小猪落玉盘

目前国内做猪的IPS细胞系的主要有广州医药与健康研究院和上海肖磊那里，还有深圳华大基因、北京畜牧研究所、南开大学、中国科技大学等等，可以多联系交流，共同提高！！

cicadacjk

建议你不要选这个题6 y" V4 y. r# J) j- s4 i! s
目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也好，都没有见到外源不沉默的）。
1 e$ _0 _. ?6 j6 ~就算你铁了心要试，也不建议你做腺病毒，小鼠腺病毒文章仅有一篇。从感染效率讲是不低，但重复性是很差的，应当是因为病毒感染导致细胞内部产生不利于重编程的变化。

上海过客

建议你不要选这个题2 d: b6 j& @& P0 ^) v
目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也 ...
* k9 x: D; S. vcicadacjk 发表于 2010-7-3 14:50

0 _/ t# y( P; N4 y% r- h; x& Y2 ?" e1 U9 M" g  f
你这么一讲 ，我到觉得  “猪的 iPS 为什么做不出来” ，倒是一个很好的课题啊 。# p) R9 M6 ~, R- T3 a9 _+ L: N
2 d# E6 m$ x  ?4 j8 Z) ]5 ?& R
人的 都可以了 ，猴子的也可以了 。但是猪的得不到 。  细微的 问题是什么呢 ？
, g: X( H8 R6 t; a4 J- k) r* F; c3 e( p$ g  z) q/ ^; \
1 信号通路的问题吗 ？
, V% i0 ]7 G# G9 e. l+ `' _! [ 2  培养基 & N$ F' [' a, M4 q$ x
3  转基因 的 基因问题  ，不被甲基化识别 ？

cicadacjk

个人观点
7 z8 ?1 Z0 z: Z& Q3 P1 z
( s$ }( c. |3 }9 n* ?培养条件尚且无法支持猪的胚胎干细胞状态
5 T: h, V6 w) S' h( R" L* |$ R, P( e6 U2 {+ Q$ U  u. P- {/ V& x
例子：大鼠的ES做了20年" G) D( N9 r9 `" S
人的ES状态还没被广泛认可

上海过客

最近有类似 小鼠ES细胞培养形态的Human  ES  细胞培养文章 。可以借鉴一下吧 ？
- G. o- c# l" h. ~$ c& q8 f* u5 z+ j  D0 W6 Y9 n/ o/ ~
& p8 g1 d, m3 I0 P9 p
不知道 猴子的 ＥＳ　细胞　能不能得到嵌合体　？　　

qizhi502

回复 5# cicadacjk
& v; s8 T% r8 k# ~; D+ ~$ K5 x; n2 a7 m" B

$ E1 V! I4 r# n   1 逆转录病毒在多能性细胞中会沉默，人的和小鼠的都可以，而猪为什么不沉默呢？这个问题确实比较困惑人，如果条件诱导（cre-loxp），是不是外源沉默细胞就传不下去了？% q$ I( U: Y, d4 z  _
   2 猪的不出来是因为还没有真正ES 出来，连个对照都没有。不过最近出来类小鼠的HES 方法确实值得借鉴

cicadacjk

对于8楼9楼的问题& l; O+ a4 |. ~. d8 ^
我的观点是
& A1 i6 n2 F- C4 F9 V1. 类小鼠的HES是依靠过表达5个因子维持的，但我们不知道其天然状态到底是跟小鼠一样，还是一种区别于当前mES和hES之外的一种状态。! i. u  }+ Z4 G) R: k
2. 在猪里面尝试得到这种细胞也很有趣，内源是全部开放的，只是在这个基础上组成型表达几个因子。目前尚无类似报道。
5 I# C( T+ _& m( |7 R3. 猴的胚胎操作还比较困难，但我自己推测现在的猴iPS是无法做出嵌合猴的。1 L) b* \4 x' w0 X! U0 A, J& k
4. 逆转录病毒沉默是重编程最后期的事件之一，这只能证明所有尝试都还没有进入最后一个阶段。