有关猪的IPS问题

chenxin

有没有人关注猪的腺病毒或载体进行ips的问题，希望找到志同道合的人，讨论一下实验中遇到的问题

ambassador

看到猪，感兴趣进来的~我们还没做iPS，你可以讲讲你们是怎么做的？
+ y; V  t& D- _9 H7 d' o1 u" @! p/ o! f( f9 d
你们做iPS的目的是什么呢？作育种吗？

stonelee2050

我打算9月份开始做呢，正在查文献学技术了。关注关注！

大猪小猪落玉盘

目前国内做猪的IPS细胞系的主要有广州医药与健康研究院和上海肖磊那里，还有深圳华大基因、北京畜牧研究所、南开大学、中国科技大学等等，可以多联系交流，共同提高！！

cicadacjk

建议你不要选这个题
& P5 m9 z8 H3 F  V' v6 t1 U' U目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也好，都没有见到外源不沉默的）。6 {: `8 |" f& l) h# w9 n0 g( M
就算你铁了心要试，也不建议你做腺病毒，小鼠腺病毒文章仅有一篇。从感染效率讲是不低，但重复性是很差的，应当是因为病毒感染导致细胞内部产生不利于重编程的变化。

上海过客

建议你不要选这个题! e5 H( ?2 X6 P. I+ Z
目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也 ...
+ J0 s" u! ^( c+ n5 W+ i# W. ~' lcicadacjk 发表于 2010-7-3 14:50

9 M+ S1 R7 Z- F9 R0 e9 Q' D
) \& ~; ~0 }# ^# J3 \; y
你这么一讲 ，我到觉得  “猪的 iPS 为什么做不出来” ，倒是一个很好的课题啊 。
/ i' u( F# I3 N: t3 k* x2 y, E* @- Z% L
3 u& Z: f$ s% a# x. s7 @3 q" x人的 都可以了 ，猴子的也可以了 。但是猪的得不到 。  细微的 问题是什么呢 ？
' q, |6 O8 P3 W- `- ^5 f( o) W6 b. ~# c
1 信号通路的问题吗 ？
) b" R! E! V: e( m; q# s 2  培养基
: f8 S" B! j1 r9 i+ o" P* R 3  转基因 的 基因问题  ，不被甲基化识别 ？

cicadacjk

个人观点8 n0 V5 g7 f6 \  A/ S- o
1 Y% z5 ~$ v( @" A. u
培养条件尚且无法支持猪的胚胎干细胞状态
# m2 @( q8 \/ h# l: z0 T+ q
/ j4 d2 O1 K+ A4 {. ]例子：大鼠的ES做了20年! |8 e. G) T5 U5 G8 [" C6 \
人的ES状态还没被广泛认可

上海过客

最近有类似 小鼠ES细胞培养形态的Human  ES  细胞培养文章 。可以借鉴一下吧 ？3 j& A9 ^  U0 M- K2 t, C
# x0 F3 Z( l: I4 t& y. V4 e
, L6 f) K9 k/ J  x& [
不知道 猴子的 ＥＳ　细胞　能不能得到嵌合体　？　　

qizhi502

回复 5# cicadacjk 5 O4 x% {( _% |; b" O5 l: D

% }, s! p. k8 _. o% N) h
! X: m! d' z, `4 v) n2 D( C   1 逆转录病毒在多能性细胞中会沉默，人的和小鼠的都可以，而猪为什么不沉默呢？这个问题确实比较困惑人，如果条件诱导（cre-loxp），是不是外源沉默细胞就传不下去了？
9 h/ x) I0 H2 [( ]% J) q   2 猪的不出来是因为还没有真正ES 出来，连个对照都没有。不过最近出来类小鼠的HES 方法确实值得借鉴

cicadacjk

对于8楼9楼的问题4 x1 L# t1 C) [7 m0 I+ _
我的观点是
4 O; I- [; N5 I1. 类小鼠的HES是依靠过表达5个因子维持的，但我们不知道其天然状态到底是跟小鼠一样，还是一种区别于当前mES和hES之外的一种状态。; v+ M0 i' B0 N, B
2. 在猪里面尝试得到这种细胞也很有趣，内源是全部开放的，只是在这个基础上组成型表达几个因子。目前尚无类似报道。0 S' r+ E# ~+ S3 X
3. 猴的胚胎操作还比较困难，但我自己推测现在的猴iPS是无法做出嵌合猴的。  G0 Z7 \8 Z* H3 w; h) @. W
4. 逆转录病毒沉默是重编程最后期的事件之一，这只能证明所有尝试都还没有进入最后一个阶段。