有关猪的IPS问题

chenxin

有没有人关注猪的腺病毒或载体进行ips的问题，希望找到志同道合的人，讨论一下实验中遇到的问题

ambassador

看到猪，感兴趣进来的~我们还没做iPS，你可以讲讲你们是怎么做的？
9 j. g9 ^. a2 x7 t/ ?: P5 F
8 d$ m% I  y. U5 O. r你们做iPS的目的是什么呢？作育种吗？

stonelee2050

我打算9月份开始做呢，正在查文献学技术了。关注关注！

大猪小猪落玉盘

目前国内做猪的IPS细胞系的主要有广州医药与健康研究院和上海肖磊那里，还有深圳华大基因、北京畜牧研究所、南开大学、中国科技大学等等，可以多联系交流，共同提高！！

cicadacjk

建议你不要选这个题9 c1 X1 |( c  j2 }0 P
目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也好，都没有见到外源不沉默的）。
! i: y! L& ^/ I& M; ]4 S* h8 J就算你铁了心要试，也不建议你做腺病毒，小鼠腺病毒文章仅有一篇。从感染效率讲是不低，但重复性是很差的，应当是因为病毒感染导致细胞内部产生不利于重编程的变化。

上海过客

建议你不要选这个题
$ L4 Y5 G' I# x  k/ p# B目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也 ...3 X$ ^2 P! i5 o; V6 \4 O3 q
cicadacjk 发表于 2010-7-3 14:50

) A9 H. g& E, r- I3 o

: K2 a( m' A( K! q  o3 F' t5 T你这么一讲 ，我到觉得  “猪的 iPS 为什么做不出来” ，倒是一个很好的课题啊 。. j( c2 D7 I8 C
8 |8 t! {+ o% E, I- z: M5 A
人的 都可以了 ，猴子的也可以了 。但是猪的得不到 。  细微的 问题是什么呢 ？% Z# O9 e( p  t9 _8 `9 X  e7 U. f$ I' `* i
! Y; b* Z6 w1 A( s* z1 X5 \
1 信号通路的问题吗 ？
) [5 I3 I& Z- ]+ ]. k 2  培养基 . J5 l( y$ d7 e/ a
3  转基因 的 基因问题  ，不被甲基化识别 ？

cicadacjk

个人观点
# L  Q) U0 S! H( p6 Z, y, F, `" K
培养条件尚且无法支持猪的胚胎干细胞状态
; n) d! `2 ?0 Q' [: X( f! F' N2 o; Y0 f6 q) q( Y8 y6 Q
例子：大鼠的ES做了20年* X& ^# W* O. E; s7 U
人的ES状态还没被广泛认可

上海过客

最近有类似 小鼠ES细胞培养形态的Human  ES  细胞培养文章 。可以借鉴一下吧 ？
2 v8 o) g9 V1 M1 ^" [
9 z- p* d. E% Q- a1 S9 p1 c, t# Y2 Y0 k: c5 k# D# q6 ?# i
不知道 猴子的 ＥＳ　细胞　能不能得到嵌合体　？　　

qizhi502

回复 5# cicadacjk
- ~4 ]. c( T( ^! x( F7 H5 u
8 o* w& E2 ?& k
, B( x9 Z) w2 _! Q7 m8 y4 P* K   1 逆转录病毒在多能性细胞中会沉默，人的和小鼠的都可以，而猪为什么不沉默呢？这个问题确实比较困惑人，如果条件诱导（cre-loxp），是不是外源沉默细胞就传不下去了？
/ [8 k: {8 Q  o. w  S+ Y   2 猪的不出来是因为还没有真正ES 出来，连个对照都没有。不过最近出来类小鼠的HES 方法确实值得借鉴

cicadacjk

对于8楼9楼的问题3 Z4 @" @8 C+ c. P9 \& l8 l/ A4 S& n
我的观点是! M# G4 m3 n5 L& m$ l8 J
1. 类小鼠的HES是依靠过表达5个因子维持的，但我们不知道其天然状态到底是跟小鼠一样，还是一种区别于当前mES和hES之外的一种状态。
$ b' B7 w7 q" K, w4 S8 Q6 m1 B2. 在猪里面尝试得到这种细胞也很有趣，内源是全部开放的，只是在这个基础上组成型表达几个因子。目前尚无类似报道。
  V( @# ^( {( h, u2 ~& i1 b3. 猴的胚胎操作还比较困难，但我自己推测现在的猴iPS是无法做出嵌合猴的。" [0 I+ ^; {& u# U
4. 逆转录病毒沉默是重编程最后期的事件之一，这只能证明所有尝试都还没有进入最后一个阶段。