有关猪的IPS问题

chenxin

有没有人关注猪的腺病毒或载体进行ips的问题，希望找到志同道合的人，讨论一下实验中遇到的问题

ambassador

看到猪，感兴趣进来的~我们还没做iPS，你可以讲讲你们是怎么做的？& n7 N- I) H6 V0 t" }. i$ X% U
/ l" P- R3 m/ N" t6 e) c0 f3 I
你们做iPS的目的是什么呢？作育种吗？

stonelee2050

我打算9月份开始做呢，正在查文献学技术了。关注关注！

大猪小猪落玉盘

目前国内做猪的IPS细胞系的主要有广州医药与健康研究院和上海肖磊那里，还有深圳华大基因、北京畜牧研究所、南开大学、中国科技大学等等，可以多联系交流，共同提高！！

cicadacjk

建议你不要选这个题. h" s4 U: j+ K# K5 S
目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也好，都没有见到外源不沉默的）。! l) ?8 h2 q3 [. V
就算你铁了心要试，也不建议你做腺病毒，小鼠腺病毒文章仅有一篇。从感染效率讲是不低，但重复性是很差的，应当是因为病毒感染导致细胞内部产生不利于重编程的变化。

上海过客

建议你不要选这个题
9 o# F) j7 I# w2 I! a目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也 ...
* Z$ W3 A% m# J7 ?/ Ucicadacjk 发表于 2010-7-3 14:50

1 o8 A6 ]0 H# Z* z7 k' y) h
3 V. W! j% ?' f. ^' p
你这么一讲 ，我到觉得  “猪的 iPS 为什么做不出来” ，倒是一个很好的课题啊 。! F5 k: R! s6 s; T; f. ^$ T

, }* W5 E- ?& v2 l人的 都可以了 ，猴子的也可以了 。但是猪的得不到 。  细微的 问题是什么呢 ？
- X; V7 Y! r1 _. B' R  a3 L" }, a  ]
1 信号通路的问题吗 ？- v" S# h2 j' q' i% L% @
2  培养基 5 o  J* D/ Q' d) p5 ]
3  转基因 的 基因问题  ，不被甲基化识别 ？

cicadacjk

个人观点
* B" ~- t  i3 U& m0 d# N
& I: y0 U0 a  _: u$ _# o培养条件尚且无法支持猪的胚胎干细胞状态
; O1 z# D3 _: r& m$ b4 Y
5 A, {, F9 m4 n5 h$ a例子：大鼠的ES做了20年
2 U* u+ F. d; H8 E; h人的ES状态还没被广泛认可

上海过客

最近有类似 小鼠ES细胞培养形态的Human  ES  细胞培养文章 。可以借鉴一下吧 ？
0 B' `  i5 T1 d9 n4 X0 G/ `% Z
7 x0 X+ z* Q0 k" V  x& O- q- V8 L  M8 T: _0 P  y. v6 a  k6 i
不知道 猴子的 ＥＳ　细胞　能不能得到嵌合体　？　　

qizhi502

回复 5# cicadacjk 5 y- H$ l3 _' _) A; W7 C- c
7 [2 c2 K* h7 ~0 f( `/ k

  T( U& u) K  R5 i+ S' Z0 t) k   1 逆转录病毒在多能性细胞中会沉默，人的和小鼠的都可以，而猪为什么不沉默呢？这个问题确实比较困惑人，如果条件诱导（cre-loxp），是不是外源沉默细胞就传不下去了？
8 P/ ?# p; i; q1 N. Y5 {5 @' j   2 猪的不出来是因为还没有真正ES 出来，连个对照都没有。不过最近出来类小鼠的HES 方法确实值得借鉴

cicadacjk

对于8楼9楼的问题# s+ O  @. g' J
我的观点是4 k# P3 S" J  E* ]
1. 类小鼠的HES是依靠过表达5个因子维持的，但我们不知道其天然状态到底是跟小鼠一样，还是一种区别于当前mES和hES之外的一种状态。
7 m' e5 s3 P8 t$ l( L; a$ @7 |2. 在猪里面尝试得到这种细胞也很有趣，内源是全部开放的，只是在这个基础上组成型表达几个因子。目前尚无类似报道。
2 j3 W: O! o% I+ P3. 猴的胚胎操作还比较困难，但我自己推测现在的猴iPS是无法做出嵌合猴的。
9 j' W( a6 b* D7 g# O8 j* n4. 逆转录病毒沉默是重编程最后期的事件之一，这只能证明所有尝试都还没有进入最后一个阶段。