CSCs的培养基成分

zhalang1000

各位老师，各位同仁，能说说你们肿瘤干细胞培养基的详细成分和含量吗？

amosummer

培养基配制每200ml无血清 DMEM/HamSF12培养基中加入5mg 牛胰岛素、20mg人转铁蛋白、 1.2g右旋葡萄糖、 1.038μg亚硒酸钠、0.8g牛血清白蛋白、l.265mg孕酮、2 mg腐胺、4mgEFG、2mgbFGF、0.8mg肝素和2ml 1%青链霉素
: X6 |8 S( Q( s- A  A

ziyan831008

细胞不同应该存在一定的差异，细胞因子应该有所不同
, U0 C9 r6 l" x6 C DMEM培养基、10ng/μl bFGF、10ng/μl N2、 10ng/μl PDGF 、1%青链霉素
# Z( b, U8 Z' q7 M( ^* m. }/ B

purehugh

$ s: O* Q7 c$ I; l
; k+ H; _9 c2 l) z& x有一种配方简称KM medium
2 K2 n9 S, T9 g7 h6 U! G' l2 h
2 \. n3 q0 c5 E0 f' gDMEM/F127 L3 A# u3 c) ^; J" ?5 c6 r4 [4 G0 ]
20ng/ml EGF
; a9 y( k# L5 a  ?& F) b3 K. J5ug/ml insulin % u0 Y# n4 p! E( ^" S
0.1uM dexamethasone $ h6 U: ]3 a( f5 s3 C
10ug/ml iron-saturated transferrin1 ^" _8 @) ]; {; G8 p. Z
4.4mM nicotinamide3 E2 |9 o) _4 \# U
0.2% BSA (Sigma)* F# T+ a# Z; u* Z- ^, X9 Z
10uM 2-mercaptoethanol
! @3 ~. |% b/ T# C. I7.6uM/l free fatty acid,
3 h- Y  Q" `- A1mM glutamine : {0 |# m  x! b5 C
1uM CuSO4! D6 P. f# e! j& M
30nM H2SeO3, Q( _$ U- @0 b+ n' V
1% P/S
0 u: |/ O% g' I' M) p
! c* e8 P- H! h1 M我自己又多添加了 20ng/ml的bFGF

咔啦

可能用得上

amosummer

回复 purehugh 的帖子% X2 Y# o* M+ h

3 S3 H% Q8 I* B' _2 I! U" n请问的EGF和bFGF配置的时候需要稀释吗？还是直接加入粉末呢？如果稀释用什么稀释呢？稀释多少倍，谢谢!

pzypig

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. d) h; f% i+ C$ e# S( e' \! M* `. V, G. H! I, {
请问您写的培养基是自己配置的还是直接购买的呢，是不是适用所有肿瘤干细胞

pzypig

回复 purehugh 的帖子9 m; `# R2 a. A# w; ]2 N! |

" O2 d5 w' ?+ w9 S$ l0 T请问您写的培养基是自己配制的还是直接购买的呢，哪个公司的，是不是适用所有肿瘤干细胞

purehugh

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6 ^  y  u) A$ `2 C( C
; _/ q3 J: B) @自己配制的。! V9 x5 ~$ p0 w: N- u  {8 R! L
DEME/F12从Invitrogen买的。
* p$ x9 A1 }8 K, h8 {EGF，bFGF从PREPROTEHCH买的。
. v) N3 W# Z& B其他都是从Sigma买的。

purehugh

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* c8 i4 A0 c( T8 F. @7 K6 Z- g8 o' J# r  X3 D( v) j) g
EGF和bFGF我是从PreProTech公司买的，感觉性价比很不错，还经常送一些小礼物。
3 o# c$ T2 v9 S, A3 ~5 G( y5 Y刚开始配制是我是按照说明说用水溶解的。
2 X  v+ F( Z- E- n! E' E9 e! i: C后来我改为用DMEM/F12溶解。因为我所有的培养基都是以DMEM/F12作为基础的。# W3 o( m6 q9 A! J- o: ^+ a2 A3 y
我个人感觉，DMEM/F12溶解后分装效果很不错。