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重读 山中的文献,再问问题,四个外源基因 Southern为什么没有做?   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2010-7-14 15:28 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
重读 山中的文献,再问问题,四个外源基因 Southern为什么没有做?/ H/ s& q0 j4 o9 {$ X3 f
- e0 o$ r( m: O) \$ u2 `$ A% h+ ^
, j) Y0 e3 ]5 N7 g7 ~/ j
既然证实了  转入四个基因 以后 会发生重编程,那么没有转入的细胞是不能编程的。
/ u1 F9 f. L; s; M6 d5 x- e7 b. D' O9 N3 l# `
iPS 都被转入了四个因子吗 ?   
4 W0 [7 w4 }+ Z- G' ]" ~/ c( [. x, O9 u8 l6 V& I4 l
1 w" T& V3 f  j7 z4 |
现在不是说 直接用病毒转染也可以 得到 iPS细胞吗 ?
4 o# g' J+ f+ m5 q- O* X& T* {0 n7 o+ \* [) t& p

, _3 q2 i( w' B或者干脆用  ES培养基来 养 MEF细胞 ,养14天 ,会是什么结果?  以前没有人这么做过吧  ?
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沙发
发表于 2010-7-16 12:30 |显示全部帖子
楼主,请问你说的“现在不是说 直接用病毒转染也可以 得到 iPS细胞吗 ?”是指哪篇文献?谢谢!我认为,如果 ...
  v6 i; p& X- H) o) H9 v9 d$ E双刀 发表于 2010-7-16 10:51
) p; T. C. Y1 n! f9 X/ ~1 Q

- W3 o1 C( I! q* W( @! P新闻版里去找线索 吧 。0 W  H1 N. ]& `) O% D
; i4 C/ b3 d1 x' L  [
MEF 里 就一定 没有多能干细胞吗?  为什么非要重编程呢?如果本来就存在多能干细胞呢?     你怎么排除 这个阴性对照的问题呢? 用什么方法呢 ?5 ^( a/ G5 U8 L' h9 @
诱导过程中出现的克隆就一定是  重编程的细胞吗 ?你 说是,那你用什么证明你的 细胞是经过重编程的 呢 ?
7 k+ z6 }8 B7 {, S& I' |
! d2 B* T; ?+ p我想起来一个科学笑话。
' U4 c/ J$ [3 v5 ]
5 J! N7 W8 `3 g. N2 e一个科学家说 :我发现了一个非常有意思的 现象
! w7 c: i! i& n% J5 G% b4 ^" i  我做了一个实验: 我对跳蚤说跳,它就跳了起来。  然后我把跳蚤的腿都弄断了以后呢 。  我再 说跳 ,跳蚤置若罔闻 了 。所以结论就是: 跳蚤 腿没了以后就变成了聋子  。8 C- a1 Y9 v$ l* _; ?* j, Z, H4 q7 m

8 q: O/ {0 ~7 x# Y   
6 M, W" s' F% e) X6 U. c  Z所以我认为 山中这个SOUTHERN没有做 是绝对的失误  。我觉得经费问题应该也解释不了这个问题 。 毕竟他 150种敲除小鼠都做了 ,  做个 SOUTHERN 是没有什么难度。6 o6 f' X6 J4 i
     SOUTHERN  是唯一能证明 iPS细胞是 转入了四个基因的细胞。这个也只是必要条件,还不是 充分条件 。        7 y7 i, y. D% J3 h4 T& y9 W

4 t2 D, P$ r+ X6 n: N  他这篇文章的附录里列了外源基因的  PCR引物,但是目前没看见  PCR结果 。 看过的同学   请  指出  。谢谢。
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