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重读 山中的文献,再问问题,四个外源基因 Southern为什么没有做?   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2010-7-14 15:28 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
重读 山中的文献,再问问题,四个外源基因 Southern为什么没有做?% n# w8 N# Y2 ^7 L7 _8 _$ t

% A( W7 Y' m6 J, ]( Z; n$ [: ^; Y: i% Z, y2 @! ]4 D$ |7 j
既然证实了  转入四个基因 以后 会发生重编程,那么没有转入的细胞是不能编程的。8 M& P- c% @* `, ^: ]7 c

$ ]1 n+ T) K, {2 n; B4 ziPS 都被转入了四个因子吗 ?   
3 `0 O7 H. q8 q2 K/ G6 y" I8 G! u9 i0 j2 W4 T- u

$ r6 I6 ^, c2 Y! d& W2 B' h* d* n现在不是说 直接用病毒转染也可以 得到 iPS细胞吗 ?) O: n1 ~5 u7 H; s% s

6 Z' N# G: R6 ]8 t6 N( E) e2 ~. W) U9 {8 q# G
或者干脆用  ES培养基来 养 MEF细胞 ,养14天 ,会是什么结果?  以前没有人这么做过吧  ?
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沙发
发表于 2010-7-16 12:30 |显示全部帖子
楼主,请问你说的“现在不是说 直接用病毒转染也可以 得到 iPS细胞吗 ?”是指哪篇文献?谢谢!我认为,如果 ...5 @1 J) g, d9 @: d
双刀 发表于 2010-7-16 10:51
4 U) y  a8 p$ ?4 V& U) y0 v
" B+ v) W4 Q# \; M$ E% v8 G4 [3 ~
新闻版里去找线索 吧 。
% J' S  c+ H# s2 X( E' l3 h! G# g% i  s
MEF 里 就一定 没有多能干细胞吗?  为什么非要重编程呢?如果本来就存在多能干细胞呢?     你怎么排除 这个阴性对照的问题呢? 用什么方法呢 ?( |' u6 B& ]0 l7 P
诱导过程中出现的克隆就一定是  重编程的细胞吗 ?你 说是,那你用什么证明你的 细胞是经过重编程的 呢 ?
; c) o% a: `4 K2 E: |$ w7 Y6 @% O2 H8 C* f) M6 U3 _1 F  }% |& B8 B
我想起来一个科学笑话。9 m% w' a  L5 V) P/ T: t0 ]- d
( F1 x7 R* Y+ a! ^2 o* C
一个科学家说 :我发现了一个非常有意思的 现象 ! F. l! @" a3 C# v& C
  我做了一个实验: 我对跳蚤说跳,它就跳了起来。  然后我把跳蚤的腿都弄断了以后呢 。  我再 说跳 ,跳蚤置若罔闻 了 。所以结论就是: 跳蚤 腿没了以后就变成了聋子  。, g$ l6 k) z" I$ K% c

, ^" _3 a" i) j. @0 ?! |% K: r    7 b! v: R7 e. d" r
所以我认为 山中这个SOUTHERN没有做 是绝对的失误  。我觉得经费问题应该也解释不了这个问题 。 毕竟他 150种敲除小鼠都做了 ,  做个 SOUTHERN 是没有什么难度。' \' T( m! I' U  A3 L' ]1 c  ~
     SOUTHERN  是唯一能证明 iPS细胞是 转入了四个基因的细胞。这个也只是必要条件,还不是 充分条件 。        
* e; b) m/ ?# f. \7 C/ [  j
" p0 ~$ Q8 j, c& |3 n  他这篇文章的附录里列了外源基因的  PCR引物,但是目前没看见  PCR结果 。 看过的同学   请  指出  。谢谢。
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