关于电泳的一个问题（电压大小的使用）

heiguzi1988

电压越大，条带越不清晰。但是电压应该也不能太小吧。. b( \( H% }4 i# d8 N7 S, ?
有谁可告知一下，琼脂糖凝胶电泳中不同区段的大小DNA片段用多大的电压么？（就是？V/cm）

上海过客

这个就像  赛跑，你 就那么长的跑道  ，  几分钟跑完了 ，第一名 和最后一名差别就不大了。
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1 g+ E3 ^' z1 D/ n: Q* ?慢跑的话 ，就能分开了。2 z0 n/ _' m8 i2 s2 z7 f2 |; i/ e

6 M* \! u! y- |/ r" Q, [" b/ z" X最佳的电泳电压  都有 文献 的 ，去分子克隆里面找吧 。 这里 估计没有。 要么到  生命科学论坛里去看看

ambassador

电泳时电压不应该超过5 v／cm，注意此处的距离指的是正负电极之间的距离，而不是凝胶的长度！通过测量，我们是用的电泳槽正负极距离大概是27cm（谢谢黄菲同学提供直尺），故电泳电压宜《27*5=135V（对于PCR产物来说，更应该低于这一数值，110~120V就行了）。平时我们用的170~180V都是太高了。) c4 ~7 ?* W* G  L: i
; A1 M" L# U( r: M
电泳温度应该低于30℃，对于巨大的DNA电泳，温度应该低于15℃（所以电泳房工作状态下必须开空调！）。; I* w+ r9 p# [7 R& H% ^- d
注意如果电泳时电压和温度过高，可能导致出现条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。特别是电压太大可能导致小片段（我们muc13的PCR片段大小应该在300bp左右，更应注意）跑出胶而出现缺带现象！

淡定

我们实验室一般是固定的电压100-103V，40mA，只是根据不同的片段长度配制不同的凝胶浓度，0.3%对应5-60kb,0.6%对应1-20kb，0.9%对应0.5-7kb，1.2%对应0.4-6kb，1.5%对应0.2-3kb。就这几个，仅供参考！

guosapphire

上面同学说的很好。我觉得你应该根据自己需要的活动的DNA大小来决定，同时也要考虑到配的胶浓度。建议不要使用>150V电压， 大片段可以考虑使用低浓度胶或延长跑胶时间来获得。

meilin0118

电压太大能把胶弄溶化了。我们实验室用120V电压。藤椅说的好好啊！

hndxws

DNA片段的大小与所需的电压没有关系，要用多少的电压与电泳槽两个电极的距离有关，理论上电压不应该超过5 v／cm，电泳的电压就是正负电极的距离*5v。但是好像超过了也没关系，但是也不能太大，还是在5v/cm以下好点。跑电泳的过程同时也是样品扩散的过程，电压太小，扩散就会多点，条带也不清晰。
3 W, _% y0 g: `( ?4 q, M4 s# F区分不同大小的片段取决于胶的浓度。

zhenhua

学习了

102795mimi

学习了，谢谢