请教什么是pre-ips？

mmssyyee

请教各位，什么是pre-ips？最近看文献，一直搞不懂。由pre-ips转变为真正的ips容易吗？添加那些文献上报道的小分子化合物真的可行吗？

cicadacjk

在重编程过程中，由于外源表达的转录因子使得细胞停留在一个人工的细胞状态，这个细胞在形态上、细胞周期上类似胚胎干细胞，甚至具备一定的分化能力，然而却不表达绝大多数内源的多能性基因。: g$ o* q) k# g( }( }* l
能继续重编程为iPS是pre-iPS的一个主要属性，文献上报道的2i就不要试了，少于2%的pre-iPS对此敏感，大约30%的pre-iPS对TGFbeta受体抑制剂(ALK5i）敏感，超过90%对维生素C敏感，采用简便的方法，可以用KSR直接培养pre-iPS。

mmssyyee

回复 2# cicadacjk

mmssyyee

回复 2# cicadacjk 谢谢您的解答，90%的细胞对VC敏感，有什么依据吗？就是裴端卿教授的那篇文章上说的吗？还有，那是单独使用VC还是需要加上VPA呀？浓度就是文章上报道的吗？如果使用KSR的话，是用的DMEM比较好还是DM/F12好呀？再次感谢！

marrowstem

如果要存在有pre-iPS细胞，就应有pre-pre-iPS细胞，就有pre-…pre…pre-iPS细胞，因为细胞的分化或逆分化过程是一线性发育过程，在每一个时间点上都是一种潜能不一的细胞，是不同的种类细胞。
. h0 K* v) h( u4 d$ x       正如有人针对肿瘤干细胞，而提出也存在癌前干细胞，癌前前干细胞和癌前前前干细胞，分别针对的是癌前病变中的组织轻-中-重度异型增生。

cicadacjk

pre-iPS是我研究的对象之一，研究结果没有发表之前我也不能透露太多信息。5 q$ F& I" ?* A& {. d$ L+ [6 `: r
只能告诉你，这是一个非天然状态，并不是重编程都必须经过pre-iPS阶段。5 ^. Q" @3 K+ ~1 e
VPA基本上对所有pre-iPS都没有用，VPA必须用在重编程的早期，其中的机理尚不清楚。
% U# G/ T' G7 N6 Y3 \1 i! CKSR培养基我们一般用knockoutDMEM配制，维生素C你按照裴端卿教授的文章加就可以了，提醒一下，必须用2位磷酸化的抗坏血酸，否则极易因为氧化而失效。5 c: l9 D# o, s$ M
. Y7 j$ X% f7 n' R/ n
细胞变化可以一线式，但是否会停留在一个稳定的中间状态就不一定了，有些所谓的概念不过是唬人的而已，事实的真相总要建立在可靠的观察之上。

snokey

请教cicadacjk两个问题：# n' `; V5 i$ I
1. 裴端卿教授文中提到“Addition of mixed antioxidants to KSR medium did not increase the basal low efficiency of reprogramming for any of these cell types , and we noticed that KSR already contains antioxidants including Vc.We then switched to a full serum protocol” 他们看到的Vc效果是在FBS条件下的，那么如果用了KSR就不需要再加Vc了？
/ A: ~  e8 N. p4 Q: [/ r- l/ H6 d, [0 f
2. 如果我想试试Vc的效果，请问能把你用过的或者知道的2位磷酸化的抗坏血酸的货号给我吗？谢谢

mmssyyee

回复 6# cicadacjk / ?6 r4 J+ P/ c4 X, h6 l0 [5 b
8 i7 M* x; M3 t1 F2 a8 C

0 D, h# N/ g* y' I    您好，我想再请教一下那个VC配的时候是用水配的吗？配好后能用多久啊？谢谢。。。

cicadacjk

我就是用水配的，冻在负二十度，上次配的有半年了吧，还在用。
4 \2 J5 d# [6 d2 u' x$ C2磷酸的维生素C在sigma上就一个货号

mmssyyee

回复 9# cicadacjk
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+ m9 v& \4 u& }+ d: \, p" g3 D
, C# K2 y3 a6 I( E5 N) F2 K# N/ @    谢谢解答。