请教什么是pre-ips？

mmssyyee

请教各位，什么是pre-ips？最近看文献，一直搞不懂。由pre-ips转变为真正的ips容易吗？添加那些文献上报道的小分子化合物真的可行吗？

cicadacjk

在重编程过程中，由于外源表达的转录因子使得细胞停留在一个人工的细胞状态，这个细胞在形态上、细胞周期上类似胚胎干细胞，甚至具备一定的分化能力，然而却不表达绝大多数内源的多能性基因。
. Z8 a" h/ X( r- q/ s5 q能继续重编程为iPS是pre-iPS的一个主要属性，文献上报道的2i就不要试了，少于2%的pre-iPS对此敏感，大约30%的pre-iPS对TGFbeta受体抑制剂(ALK5i）敏感，超过90%对维生素C敏感，采用简便的方法，可以用KSR直接培养pre-iPS。

mmssyyee

回复 2# cicadacjk

mmssyyee

回复 2# cicadacjk 谢谢您的解答，90%的细胞对VC敏感，有什么依据吗？就是裴端卿教授的那篇文章上说的吗？还有，那是单独使用VC还是需要加上VPA呀？浓度就是文章上报道的吗？如果使用KSR的话，是用的DMEM比较好还是DM/F12好呀？再次感谢！

marrowstem

如果要存在有pre-iPS细胞，就应有pre-pre-iPS细胞，就有pre-…pre…pre-iPS细胞，因为细胞的分化或逆分化过程是一线性发育过程，在每一个时间点上都是一种潜能不一的细胞，是不同的种类细胞。
9 N, B7 e2 H* y4 ?5 q7 J/ Z7 |6 \& C       正如有人针对肿瘤干细胞，而提出也存在癌前干细胞，癌前前干细胞和癌前前前干细胞，分别针对的是癌前病变中的组织轻-中-重度异型增生。

cicadacjk

pre-iPS是我研究的对象之一，研究结果没有发表之前我也不能透露太多信息。8 ^, h+ L3 z! a" x+ \
只能告诉你，这是一个非天然状态，并不是重编程都必须经过pre-iPS阶段。
5 [% s% s$ E  Y! `VPA基本上对所有pre-iPS都没有用，VPA必须用在重编程的早期，其中的机理尚不清楚。2 g% |3 O) q) R' E1 L0 F9 B9 Y
KSR培养基我们一般用knockoutDMEM配制，维生素C你按照裴端卿教授的文章加就可以了，提醒一下，必须用2位磷酸化的抗坏血酸，否则极易因为氧化而失效。
2 z" R! B- [2 n. d) K& X3 g$ W$ @, R& ?
细胞变化可以一线式，但是否会停留在一个稳定的中间状态就不一定了，有些所谓的概念不过是唬人的而已，事实的真相总要建立在可靠的观察之上。

snokey

请教cicadacjk两个问题：
2 e" V+ g% Z* z1. 裴端卿教授文中提到“Addition of mixed antioxidants to KSR medium did not increase the basal low efficiency of reprogramming for any of these cell types , and we noticed that KSR already contains antioxidants including Vc.We then switched to a full serum protocol” 他们看到的Vc效果是在FBS条件下的，那么如果用了KSR就不需要再加Vc了？
3 P% N' u, Y- ?* P! b' l- k" x" J# Z# i
2. 如果我想试试Vc的效果，请问能把你用过的或者知道的2位磷酸化的抗坏血酸的货号给我吗？谢谢

mmssyyee

回复 6# cicadacjk 2 \2 {% O# L7 {7 ^
/ ]$ x+ z5 p4 s4 m
; J6 g+ U) Q8 {4 i' ?* E, a
    您好，我想再请教一下那个VC配的时候是用水配的吗？配好后能用多久啊？谢谢。。。

cicadacjk

我就是用水配的，冻在负二十度，上次配的有半年了吧，还在用。: q0 n( G$ A# C7 T6 Y6 Y
2磷酸的维生素C在sigma上就一个货号

mmssyyee

回复 9# cicadacjk 8 d7 R# r# {' `5 X8 O
9 E8 _+ f0 T' x" k  X- ^2 G

2 S: Y1 e5 B! L; j- ~7 v    谢谢解答。