新人求助： 读文献时关于coIP和biotin-tag的疑惑

zhongshanlh

读文献时遇到的问题，自己想不明白，请教大家。
9 |5 x7 O4 S' i% N' g( k- t- S1 ?我们知道为了鉴定在细胞中和已知的某种蛋白相互作用的其他蛋白，coIP后拿去做质谱是非常常用有效的一种手段。
  `- I4 |8 ]  K5 P读文献时，这里我有一个疑问：* n# k: ]) M/ I7 J
为了鉴定和PRC2（Polycomb repressive complex2）作用 的蛋白，作用实施了coIP以及tandem coIP，coIP中用链霉亲和素纯化，tandem coIP中用FLAG-tag和biotin-tag双标记，然后先用anti-flag纯化，再将此洗脱成分用链霉亲和素纯化。% {0 P' ?0 n/ N5 m: G1 }
这里的第一个疑问是为什么要同时进行两个实验（即coIP和tandem coIP，有区别和意义吗）？
( B! T' q6 Q" s& a7 w6 J第二个疑问是 作者使用biotin-tag时为什么要在细胞中同时表达bacterial biotin ligase (BirA)，即BirA的作用是什么？
$ P; u0 y: ?: S" l! u) e1 q可能我描述的不够详细，附原文，请各位赐教，小弟为新人

xzt41

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同样有这样的困惑。。。