新人求助： 读文献时关于coIP和biotin-tag的疑惑

zhongshanlh

读文献时遇到的问题，自己想不明白，请教大家。 8 @( g& c1 ~' S3 }8 M9 ^7 G
我们知道为了鉴定在细胞中和已知的某种蛋白相互作用的其他蛋白，coIP后拿去做质谱是非常常用有效的一种手段。! O) O* g9 [0 T8 f
读文献时，这里我有一个疑问：+ T; @; ^: b, H/ M
为了鉴定和PRC2（Polycomb repressive complex2）作用 的蛋白，作用实施了coIP以及tandem coIP，coIP中用链霉亲和素纯化，tandem coIP中用FLAG-tag和biotin-tag双标记，然后先用anti-flag纯化，再将此洗脱成分用链霉亲和素纯化。" ]6 P- C; J  `( x) H- W. |1 A
这里的第一个疑问是为什么要同时进行两个实验（即coIP和tandem coIP，有区别和意义吗）？* @. [3 R1 p8 n( X% h" _1 n" k8 L
第二个疑问是 作者使用biotin-tag时为什么要在细胞中同时表达bacterial biotin ligase (BirA)，即BirA的作用是什么？, @+ ^( n* e  R2 o/ N1 X# d
可能我描述的不够详细，附原文，请各位赐教，小弟为新人

xzt41

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同样有这样的困惑。。。