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脐带的分离遇到难题   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-11-5 09:39 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
脐带用胰酶消化后过筛很粘稠,什么原因?怎么处理啊?单纯稀释可以么?有没有更好的办法?
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沙发
发表于 2010-11-5 09:47 |只看该作者
1.是不是消化的时间不够?6 G6 v4 M0 g2 G9 |- l4 v* t( ~
2.是不是没有吹打散开充分?2 a5 K  v+ k. ]
3.另一个办法就是换筛。
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藤椅
发表于 2010-11-5 13:29 |只看该作者
0.05%胰酶消化1h(大概每1cm加消化液3-4ml),0.1%胶原酶2消化1h.我刚开始摸索条件,不知道合适不?请指点~~& Z: J+ o# K* O
筛子用的是150目的,大小感觉可以了。
% ~# ?  C2 U9 X2 x咨询了一些人,说法不一,有的说是因为DNA缠绕在一起了,所以我加了DNA裂解酶,效果不是很好;有的说是胶原蛋白的原因,不知道用什么方法可以去除,二硫苏糖醇可以么?
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板凳
发表于 2010-11-5 13:32 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
因为很粘稠,所以分散可能受限,加入了一步离心,效果也不太好

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报纸
发表于 2010-11-5 13:39 |只看该作者
目前我就是加大稀释倍数,反复离心洗涤来解决的,但是收集的细胞数也不是很理想。
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地板
发表于 2010-11-8 16:20 |只看该作者
谢谢柏林小杨。,大家要帮帮我哦

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发表于 2010-11-9 14:15 |只看该作者
遇到同样问题,如果有好的解决方法,要分享啊

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发表于 2010-11-16 09:14 |只看该作者
没有人回应哦~~呜8 i, d0 r2 }/ ~7 r0 n
有好的解决方法要分享一下哈

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发表于 2010-11-16 09:36 |只看该作者
学习了

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发表于 2010-11-16 09:38 |只看该作者
脐带间充质干细胞的分离没那么麻烦。把中间的华通胶剥出来,剪碎,放在培养皿里面培养就好。它会从剪碎的组织块往四周爬出来的。等差不多张满了,消化一下,去掉组织块就好了。
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