原代细胞培养条件对细胞的影响 ，难以捉摸

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最近我们对原代细胞培养条件进行摸索，原以为胰酶和PBS有问题，因为 PBS是买的那种粉剂直接溶解的那种 ，所以一直不知道里面含有钙钾离子，最近有人做实验才知道里面有 钙钾离子，所以以为这影响了消化效果，所以原代做的不好，但是周三做的那批却长的挺好 （用的是含钙镁离子的PBS及胰酶 ），所以现在很纳闷，到底是什么因素影响的原代啊？请大家帮帮忙，看看到底是什么问题！

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回复 shiqingxi 的帖子* u9 S7 ~8 D. G" m) D) e5 i( U
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由于钙镁离子会影响胰酶的消化能力，所以在原代消化时可能 消化的细胞数量很少，加上细胞的密度依赖性，原代就可能长不好，所以还是有影响的，但是最重要的影响就不知道是什么了，所以有点质疑。

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回复 痞子的烟头 的帖子
( O! Z! P9 p0 s( A% B
& l8 f) J) x1 L7 k我们很多次都是细胞贴壁不伸展，不知道是不是消化时间过了，血清不知道有没有问题，一直用的是四季青的。你能不能给我分析一下不伸展的原因呢？这个让我感到很困扰，谢谢啦。

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回复 daviehe 的帖子
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不是不用，而是买的那种包装的PBS 没标注无钙镁离子，最后才发现这个问题的，原来一直以为养细胞用，不会购买含钙镁离子的呢。

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回复 daviddow 的帖子* E( ?6 g5 E) U# J7 z! ?
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培养基是买的那种袋装的，然后自己溶解后调pH=7.2过滤后用，应该没什么问题啊，这个怎么影响原代培养呢？你能解释一下吗？谢谢啦！