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iPS中的factor delivery system的研究对于安全、高效iPS的诱导具有很重要的作用,从yamanaka的第一篇iPS开始,这一块的研究一直在不断发展和进步,取得了可喜的成果,特别是今年的mRNA诱导iPS,实现了iPS在安全、高效、快速的诱导。以下是个人总结的进展并附上主要paper:3 b; {8 {5 U0 j/ Q, t
$ n/ B) S; _* T( |1、首先是iPS的开山之作,yamanaka利用逆转录病毒载体将S/K/O/M四因子导入MEF成功获得iPS:# ?5 F9 |+ J: N7 N. g
! h% G+ Z" `1 w% x c
& @2 D5 `9 t/ t) H. `2、逆转录病毒只能感染分裂期的细胞,Yu JunYing在hiPS中发展了由逆转录病毒改造过来的组成型的慢病毒载体
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& h9 Y" R: j/ G9 n8 g" }& ^9 ]: ?5 Z5 O9 Y" h: t
3、为了实现对外源基因表达的控制,对前面组成型的慢病毒进一步改造,构建了四环素诱导系统(doxy系统,诱导型)
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$ d1 R. c+ ~4 [4 u _0 g6 n
" Q, R2 S$ H" r, j4、前面的方法都存在基因整合的缺陷,Hochedlinger发展了腺病毒载体诱导系统,文章发在science上,这篇文章解决了外源基因整合的问题,但腺病毒转进去后降解很快,需要重复感染
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" S; D# B8 p7 H! G5、同期science上还发表了一篇yamanaka小组做的质粒诱导iPS的文章,同样解决和整合问题,但也要重复感染:
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+ @% X( L& s8 x' w0 B7 q' U9 }0 f5 p' Z* E: j K, ?- g! p
6、nature上两篇文章结合了逆转录病毒与腺病毒、质粒的优点,即持续表达且不整合。一篇采取的策略是利用PB转座子携带外源基因,先整合再瞬时表达整合酶对外源基因进行切除。
& E, D$ X+ s* O: O% \2 h) k: n: x6 J1 Q% H
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7 另一篇作者进一步利用cre酶/loxp系统,同样达到了以上的效果& G& M0 ~& k0 H/ q7 o8 }
: U' g# M8 s1 z' v
. C: g$ w8 j; O T' s2 N" m. @
8、丁盛的重组蛋白诱导iPS无疑是一个重大突破,它避免了遗传物质的导入,但是效率很低,而且蛋白的表达纯化比较困难
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: Y9 y/ P/ w2 _+ L$ J0 U& ^! T( h; S- h
9、今年发的这篇应该是这一块最重大的突破了,由17个很牛的单位联合完成,同时也被science杂志评为今年的十大科学突破,足见安全iPS的诱导意义有多重要。
7 Q1 @; [8 B) G' s7 m, U0 M4 R2 d p5 L3 H) K, [
) A9 A" W$ i r+ u D8 p9 k9 \& K, Q
另外丁盛透露已经实现了完全用化学小分子诱导iPS,这必将是iPS领域的又一重大突破,期待这篇文章……1 `& y1 A3 ~3 [! |; P
1 x' N: f* ~8 J7 H! I5 L
上面是我个人的总结,难免有疏漏,恳请大家批评指正补充……, W; S" y3 @( i
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